アフリカツメガエル卵母細胞における翻訳調節機構
非洲爪蟾卵母细胞的翻译调控机制
基本信息
- 批准号:12029223
- 负责人:
- 金额:$ 1.41万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
動物の卵母細胞には多くの母性mRNAが翻訳されずに貯蔵mRNPとして蓄えられている。我々は、翻訳抑制の分子機構について、アフリカツメガエル卵母細胞の貯蔵mRNPを構成するRNA結合蛋白質に着目して研究を行なっている。本研究ではまず、貯蔵mRNPを構成する主要なRNA結合蛋白質であるFRGY2蛋白質とmRNAとの複合体を試験管内で形成させ、その性状について解析した。大腸菌で発現させたFRGY2と、SP6あるいはT7RNAポリメラーゼによる転写によって調製したmRNAとをインキュベートすると、安定なFRGY2-mRNA複合体の形成が観察された。電子顕微鏡を用いた観察の結果、蛋白質がRNA全体をおおっているような構造が見られた。この複合体をウサギ網状赤血球ライセート無細胞系に添加すると、その翻訳効率は裸のmRNAに比べて大きく低下していた。また、FRGY2との複合体の形成により、mRNAのRNase感受性が低下することがわかった。これらの結果は、このFRGY2-mRNA複合体は、FRGY2によってmRNAがパッケージされたものであり、母性mRNAを細胞内で翻訳させずに安定に長期間保存するという貯蔵mRNPの機能を再現するものであることを示唆している。我々がアフリカツメガエル卵母細胞から単離した20kDのRNA結合蛋白質はリポソーム画分と共沈し翻訳への関与が考えられていた。この蛋白質は卵母細胞では細胞質に存在するのに対して、体細胞由来の培養細胞では核に局在が見られるが、核-細胞質間をシャトルする能力を持つことがわかった。この蛋白質の細胞間での局在の違いに興味を持ち、培養細胞での核移行に必要な領域を同定した。
Animal oocytes contain multiple maternal mRNA, which are stored in the oocytes. We are currently studying the molecular mechanisms for the inhibition of transcription and expression of RNA-binding proteins in oocytes. In this study, the main RNA-binding proteins and FRGY2 protein-mRNA complexes were analyzed for the formation and characterization of mRNP. The expression of FRGY2 and SP6 in E. coli was detected by T7RNA polymerase chain reaction (PCR). The results of electron microscope observation show that the structure of protein and RNA is completely different. This complex is characterized by a large increase in the percentage of naked mRNA in reticular cells and a decrease in the percentage of naked mRNA in cells. FRGY2 complex formation, mRNA RNase susceptibility is low These results indicate that FRGY2-mRNA complexes are stable and stable for long-term preservation, and that FRGY2-mRNA complexes are stable and stable for long-term preservation. We found that oocytes were isolated from 20kD RNA-binding proteins and co-cultured with them. The protein is present in the cytoplasm of oocytes, derived from somatic cells and cultured in the nucleus. The protein is present in the cytoplasm of oocytes and cultured in the nucleus. These proteins are essential for cellular migration and for cell culture.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Matsumoto,K.et al.: "CIRP2,a major cytoplasmic RNA binding protein in Xenopus oocytes."Nucleic Acids Research. 28. 4689-4697 (2000)
Matsumoto, K. 等人:“CIRP2,非洲爪蟾卵母细胞中的一种主要细胞质 RNA 结合蛋白。”核酸研究。
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
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- 影响因子:0
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吉田 稔
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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今川 重彦
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