カルシウム/カルモデュリン依存性多機能性タンパク質リン酸化酵素の活性制御機構

钙/钙调蛋白依赖性多功能蛋白激酶活性的调节

基本信息

批准号：
07457578
负责人：
藤澤仁
金额：
--
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.カルシウム/カルモデュリン依存性タンパク質リン酸化酵素II(CaMキナーゼII)1)CaMキナーゼIIの特異的な活性阻害ペプチド(AIP)を開発し、これまで市販され使われてきた阻害剤、KN-93などと比べると桁違いに強力且つ特異的な阻害剤であることを示した。2)上記AIPを用いて膵臓からのインスリン分泌に関与するサイクリックADPリボースによる小胞体からのカルシウム遊離にCaMキナーゼIIが作用していることを明らかにした。3)CaMキナーゼIIの自己活性抑制ドメインは酵素を不活性化しているだけでなく酵素の安定化もしていることを示し、その機能について調べた。4)CaMキナーゼIIのスレオニン^<28.6>の自己リン酸化がCaMキナーゼIIの著明な活性化を引き起こすという我々の考えを証明した。2.カルシウム/カルモデュリン依存性タンパク質リン酸化酵素IV(CaMキナーゼIV)1)CaMキナーゼIVの活性発現のために必要なカルシウム/カルモデュリンは酵素の不活性化作用も併せ持っていることを示した。2)CaMキナーゼIVはCaMキナーゼIVキナーゼによって一個のリン酸化を受けて活性化されるが、その後カルシウムイオン濃度が低下すると、セリン^<332>を自己リン酸化してカルシウム/カルモデュリン依存性活性を失うことを明らかにした。3)CaMキナーゼIVキナーゼをラットの脳からクローニングし明らかにしたアミノ酸配列から特異抗体を調製した。4)CaMキナーゼおよびCaMキナーゼIVキナーゼの脳内分布、細胞内分布を免疫組織学的に調べ、両者の分布を比較検討した。

1。钙/钙调蛋白依赖性蛋白磷酸酶II（CAM激酶II）1）我们已经开发了CAM激酶II的特定活性抑制剂（AIP），并表明它是与迄今已商业上可用和使用的抑制剂相比，它是一个更强和比较特定的抑制剂，例如迄今为止使用kN-93。 2）使用上面的AIP，我们揭示了CAM激酶II通过环状ADP核糖作用于内质网的钙释放，这与胰腺的胰岛素分泌有关。 3）我们表明，CAM激酶II的自动绩效抑制域不仅使酶失活，而且还稳定了酶，并研究了其功能。 4）我们已经证明了我们的观念，即CAM激酶II的苏氨酸^<28.6>自磷酸化会引起CAM激酶II的显着激活。 2。钙/钙调蛋白依赖性蛋白磷酸酶IV（CAM激酶IV）1）证明，CAM激酶IV的活性表达所必需的钙/钙调蛋白也具有酶失活效应。 2）据揭示了CAM激酶IV通过通过CAM激酶IV激酶进行单个磷酸化而激活的CAM激酶IV，但是当钙离子浓度随后降低时，它会自磷酸化丝氨酸^<332>并失去钙/钙蛋白依赖蛋白依赖蛋白依赖性活性。 3）从大鼠脑的克隆CAM激酶IV激酶揭示的氨基酸序列中制备了特定的抗体。 4）通过通过免疫组织化学检查了CAM激酶和CAM激酶IV激酶的大脑和细胞分布，并比较了两者的分布。