血小板インテグリンαIIbβ_3の活性化機構に関する研究

血小板整合素αIIbβ_3激活机制研究

• 批准号: 07671201
• 负责人: 冨山 佳昭
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671201/
• 关键词: αIIbβ3; インテグリン; 血小板; Na^+; Ca^<2+>exchanger; H^+exchanger

本研究では、いまだ不明であるαIIbβ3の活性化機構をキモトリプシン(以下キモと略す)処理血小板を用いた実験系を用いて明らかにすることを目的とした。キモは従来、シグナル伝達を介さずαIIbβ3を活性化させると考えられていた。事実、キモによるαIIbβ3活性化は放出反応や細胞内Ca^<2+>イオン濃度の上昇を伴わず、PGE_1やsodium nitroprussideなど種々の阻害剤でも抑制されなかった。しかし、われわれはキモによるαIIbβ3活性化がNa^+/H^+exchangerの阻害作用を有するamilorideで抑制されることを見いだした。さらに、amilorideがαIIbβ3とフィブリノーゲンの結合を抑制するのではなく、細胞内シグナル伝達を抑制することをAP5などの活性化モノクローナル抗体を用いて明らかにした。しかしながら、キモによるαIIbβ3活性化は細胞外Na^+濃度を減少させるに従い増加したため、αIIbβ3の活性化にはNa^+/H^+exchangerなどを介したNa^+の細胞内への流入ではなくNa^+の細胞外への流出が重要であると考えられた。さらに、キモ処理血小板では細胞外Na^+/H^+依存性に^<45>Ca^<2+>の細胞内への取り込みが増加すること、Na^+/Ca^<2+>exchangerの阻害剤である3′,4′-dichlorobenzamil (DCB)やbepridilによりαIIbβ3活性化が特異的に抑制されることを明らかにした。これらの成績よりαIIbβ3活性化には当初予想したNa^+/H^+exchangerではなくNa^+/Ca^<2+>exchangerが重要であると考えられた。以上のように、本研究によりαIIbβ3活性化のシグナル伝達機構においてNa^+/Ca^<2+>exchangerの重要性が始めて明らかとなった。

The purpose of this study is to investigate the mechanism of activation of αIIbβ3 in human platelets. In addition, the αIIbβ3 is activated in the presence of the αIIbβ3 in the presence of the α IIbβ3. The activity of αIIbβ3 was inhibited by PGE_1 and sodium nitroprusside.αIIbβ3 activation is inhibited by amiloride. In addition, amiloride αIIbβ3 and αIIbβ3 can inhibit the binding of α IIb β 3 and α IIb β 3 to α IIb β 3, and can inhibit the binding of α IIb β 3 and α IIb β 3 to α IIb β 3. The activity of αIIbβ3 decreases the extracellular Na^+ concentration, increases the Na^+/H^+exchanger ratio, and decreases the intracellular Na ^+ influx and extracellular Na^+ efflux. In addition, the increase of extracellular Na^+/H^+ dependent Ca <45>^&lt;2+&gt; and intracellular Ca^&lt;2+&gt; activation and the inhibition of Na^+/Ca^&lt;2+&gt;exchanger by 3′,4′-dichlorobenzamil (DCB) and bepridil αIIbβ3 activation were also observed. The αIIbβ3 activation was initiated by the Na^+/Ca ^+exchanger. The importance of Na^+/Ca^&lt;2+&gt;exchanger in the activation of αIIbβ3 in this study begins to be clarified.

项目成果

Y.Tomiyama,et al: "Abnormal processing of the glycoprotein IIb transcript due to a nonsense mutation in exon 17 associated with Glanzmann′s thrombasthenia." Thrombosis and Haemostasis. 73. 756-762 (1995)

Y. Tomiyama 等人：“由于与格兰茨曼血小板无力症相关的外显子 17 中的无义突变导致糖蛋白 IIb 转录物的异常加工。” 73. 756-762 (1995)。

H.Kashiwagi,et al: "Family studies of typeII CD36 deficient subjects : linkage of a CD36 allele to a platelet-specific mRNA expression defect(s)causing typeII CD36 deficiency." Thrombosis and Haemostasis. 74. 758-763 (1995)

H.Kashiwagi 等人：“II 型 CD36 缺陷受试者的家庭研究：CD36 等位基因与导致 II 型 CD36 缺陷的血小板特异性 mRNA 表达缺陷的联系。”

S.Kosugi,et al: "Platelet-associated anti-glycoprotein (GP) IIb-IIIa autoantibodies in chronic immune thrombocytopenic purpura mainly recognize cation-dependent conformations : comparison with the epitopes of serum autoantibodies." Thrombosis and Haemosta

S.Kosugi 等人：“慢性免疫性血小板减少性紫癜中的血小板相关抗糖蛋白 (GP) IIb-IIIa 自身抗体主要识别阳离子依赖性构象：与血清自身抗体表位的比较。”

H.Kashiwagi,et al: "Molecular basis of CD36 deficiency : evidence that a 478C→T substitution (proline90→Serine) in CD36 cDNA accounts for CD36 deficiency." Journal of Clinical Investigation. 95. 1040-1046 (1995)

H. Kashiwagi 等人：“CD36 缺陷的分子基础：CD36 cDNA 中 478C→T 取代（脯氨酸90→丝氨酸）导致 CD36 缺陷的证据。” 临床研究杂志 95. 1040-1046 (1995)。