組織における線溶反応の動的制御機構の分子生物学的解析

组织纤溶反应动态控制机制的分子生物学分析

• 批准号: 07671221
• 负责人: 坂田 洋一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671221/
• 关键词: α_2プラスミンインヒビタ; シアリルルイスX構造; セレクチン; 組織線溶

プラスミノゲンアクチベータ(PA)、プラスミンを介する線維素溶液反応(線溶反応)は、血栓溶解のみならず、組織修復や、癌の浸潤などにも重要な役割を果たしている。この組織線溶に関わるPAとしては、ウロキナーゼ型PAが主役であり、これが細胞に結合し、同じく細胞に結合したプラスミノゲンを細胞表面上で化学反応論的に有効に活性化することで反応が開始される。この反応の制御因子としてはPAインヒビター1(PAI-1)とα_2-プラスミンインヒビタ(α_2-P1)が考えられる。PAI-1は細胞間物質であるビトロネクチン、或いはプロテオグリカンと結合して、局所に存在し、PAを制御していることが明らかにされている。一方、細胞表面で生じたプラスミンは、血流中に存在するα_2-Plには阻害を受けにくいことが報告されている。また、α_2-Plの細胞上への特異的結合部位の存在は知られていない。我々が、α_2-Plを精製し糖鎖を解析したところ、量的には多くないが、GlcNAcにFucがα1-3結合し、非還元末端側のGalβ-4GlcNAc構造(ルイスX構造)を含んだ三本鎖複合型構造の存在が示唆された。本年度はα_2-Plが本当にその構造上にシアリルルイスX構造を持つ糖鎖を有するかいなかを更に何通りかの方法により詳細な解析を試み、これを確認した。またLPS, TNFなど細胞表面にセレクチンを発現させるような炎症性サイトカインにより、血管内皮細胞を刺激し、内皮細胞とα_2-Plが結合を解析したところ、刺激細胞において、α_2-Plの結合は有意に増加した。またこのα_2-Plは、プラスミン抑制活性を保持していることが確認された。現在さらにセレクチンを遺伝子工学的に特異的に発現させ、α_2-Plがセレクチンと結合する事を化学反応論的に解析中である。

In addition, the preparation of vitamin solution (X-ray solution), thrombolysis, tissue repair, cancer invasion, and other important service results are also discussed. This tissue lysis is related to PA, which is active in cells and active in chemical reactions on cell surfaces. The control factor of this reaction is PA-1(PAI-1) and α_2-P1 (α_2-P1). PAI-1 is an intercellular substance that binds to and controls PA. The expression of α_2-P_1 on the surface of a cell and in the bloodstream is reported. The existence of specific binding sites on α_2-Pl and α_2-Pl cells is not known. The analysis of α_2-P_1 refined glycan chains shows the existence of a three-dimensional complex structure, which is composed of α_1 -3 bonds and Galβ-4 GlcNAc structures on the non-reductive terminal side. This year, the α_2-P_1 structure was analyzed in detail, and the X structure was confirmed. LPS, TNF and α_2-Pl binding on the surface of endothelial cells were stimulated by LPS, TNF and α_2-Pl binding on endothelial cells was increased intentionally. The α_2-Pl inhibitory activity was confirmed to be stable. At present, there are some special discovery and analysis of α_2-P_1 interaction in molecular engineering.

项目成果

Koichi Arai: "Effect of staphylokinase concentration on plasminogen activation" Bichimica Biophysica Acta. 1245. 69-75 (1995)

Koichi Arai：“葡激酶浓度对纤溶酶原激活的影响”Bichimica Biophysical Acta。

Kazuki Niwa: "AγGly-268 to Glu substitution is responsible for impaired fibrin assembly in a homozygous dysfibrinogen Kurashiki l." Blood. (in press).

Kazuki Niwa：“AγGly-268 替换为 Glu 是导致纯合异常纤维蛋白原 Kurashiki l 血液中纤维蛋白组装受损的原因。”

渡辺尚: "先天性アンチトロンビンIII欠乏症合併妊娠の産科管理" 日本産婦人科・新生児血液学会誌. 5. 74-81 (1995)

Hisashi Watanabe：“先天性抗凝血酶 III 缺乏症妊娠的产科管理”日本妇产科和新生儿血液学会杂志 5. 74-81 (1995)。