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ウニ胚誘導因子の研究

海胆胚胎诱导因子的研究

基本信息

批准号：
07680801
负责人：
赤坂甲治
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680801/
关键词：
ウニ胚誘導因子アクチビン

项目摘要

ウニ胚からの誘導因子の単離を試みたが、多大の努力にもかかわらず成功には至らなかった。最近、両生類において誘導因子は阻害因子と複合体を形成して存在していることが報告されてきており、ウニ胚においても誘導因子が不活性型として存在している可能性がある。今回用いた精製方法では活性がモニターできなかったと考えられる。そこで、戦略を変えて遺伝子の単離を試みた。アクチビンは両生類において、予定外胚葉の中胚葉誘導因子として知られる一方、様々な生物種からcDNAがクローニングされ、アミノ酸の保存配列も明らかになっている。そこで、保存されているアミノ酸配列に相当するオリゴヌクレオチドをプライマーとし、PCR法でウニ胚のRNAからcDNAをクローニングすることを試みた。その結果、予想される長さのフラグメントが得られ、その塩基配列にコードされているアミノ酸配列は保存配列と一致した。従って、ウニ胚にもアクチビンmRNAが存在することが示唆された。得られたPCR産物をプローブにウニ胚の未受精卵、胞胚期、間充織胞胚期、原腸胚期のcDNAライブラリーをスクリーニングしたが、残念ながらポジティブなシグナルは得られなかった。おそらく、コピー数がきわめて少ないものと考えられる。両性類においても、初期胚のアクチビンmRNA量は少なく、卵には既にタンパク質として蓄積されていることが報告されていることから、未成熟卵のライブラリーからのスクリーニングが必要と考えられる。一方、今回の一連の研究でCaイオノフォア処理により、予定口側外胚葉が反口側外胚葉に分化することが見いだされた。誘導因子の情報は細胞膜を介し、さらに細胞内伝達系を介して核に伝わると考えられるが、Caイオンを介した細胞内情報伝達系が口側外胚葉の誘導に深く関わっていることが示唆された。

ウニEmbryo からのinducing factor の単出をtrial みたが, 大のeffort にもかかわらず Success には to らなかった. Recently, there has been a report on the existence of biological inducing factors and inhibitory factors and complexes. There is a possibility that the inactive type of れてきており and ウてにおいても-inducing factor exists. This time, I used the いたrefining method of ではactivated がモニターできなかったとtest えられる.そこで、戦性を変えて缝子の単里をtrialみた.アクチビンは両生kindにおいて, predetermined ectoderm のmesodermal induction factor として知られる Party, 様々なbiotic species からcDNA がクローニングされ, アミノ acid の preservation arrangement も明らかになっている.そこで、Save the されているアミノ acid preparation に quite するオリゴヌクレオチドをプライマーとし, PCR method でウニのRNAからcDNAをクローニングすることをtestみた. The result of その, the thought of される长さのフラグメントが got られ, その塩记The arrangement of the acid arrangement is the same as the arrangement of the acid.従って、ウニEmbryonic にもアクチビンmRNAがExistenceすることが Shows instigationされた. The cDN of the unfertilized egg, blastocyst stage, mesenchymal blastula stage, and gastrula stage of the られたPCR product was obtained. Aライブラリーをスクリーニングしたが, Cannianながらポジティブなシグナルは得られなかった.おそらく、コピー数がきわめて小ないものと卡えられる.両Sex type, early embryo, small amount of mRNA, egg quality, and accumulation, Immature egg reportブラリーからのスクリーニングがと考えられる. On the one hand, this chapter's research on one series of Caイオノフォアprocessingにより, predetermined oral side ectoderm and anti-oral side ectoderm にdifferentiation することが见いだされた. Inducible factor informationはcell membraneをmediatedし、さらにIntracellular 伝da systemをしてnuclearに伝わると考えられるが、C aイオンを开したIntracellular information 伝达行が口lateralectodermのinducingに深く关わっていることがshows instigationされた.