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初期卵割期の速いDNA複製機構に関する研究

早期裂解阶段DNA快速复制机制的研究

基本信息

批准号：
13878155
负责人：
赤坂甲治
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

卵生の多くの動物種においては、受精直後の細胞分裂速度は通常の体細胞分裂速度に比べて非常に速く、DNA複製速度は体細胞のそれの数十倍の速度に達する。DNAポリメラーゼの複製速度は一定であるが、複製開始点が増加することにより染色体DNAの複製が短時間で終了するという可能性が古くから示されている。しかし、複製開始点の増加を司る因子や機構についてはまったく不明であり、ほとんど研究の積み重ねがないのが現状であった。我々は、染色体DNA上にG-stretchが散在すること、およびG-stretchに結合する因子がDNA合成期の核に存在することを明らかにしており、当研究ではG-stretch結合因子とDNA複製とのかかわり合いを解析した。研究の結果、G-stretch結合因子は2本鎖がほどけたDNAに結合することが明らかになり、大腸菌や酵母で明らかにされている、DNA複製開始機構とよく似た機構が、卵割期の速い複製でもはたらいている可能性が示せた。また、細胞周期のM期に分解されるためのシグナル配列を除去したDNA結合ドメインを発現させると、染色体分離が異常になり細胞死が引き起こされることが明らかになった。さらに、ヒトとショウジョウバエでもホモログをクローニングし、ショウジョウバエの系でRNAi法によりG-stretch結合因子の発現を抑制したところ、致死となることが明らかになった。本研究により、初期卵割期の速いDNA複製機構に関する研究の基盤が整ったと考えられる。

In many animal species, the rate of cell division after fertilization is tens of times faster than that of normal somatic cells, and DNA replication is dozens of times faster than that of somatic cells. DNA replication speed is constant, replication start point is increased, and chromosome DNA replication is short. For example, if you want to copy the starting point, you can add the following factors: Since it has become clear that G-stretches are scattered on chromosomal DNA and that G-stretch binding factors exist in the nucleus during DNA synthesis, research has been conducted to analyze the combination of G-stretch binding factors and DNA replication. The results of the study showed that the G-stretch binding factor could bind to DNA in two different ways, such as in Escherichia coli and yeast, in the initiation mechanism of DNA replication, and in the speed of replication in the egg stage. The cell cycle is broken down into M phases, DNA binding is eliminated, chromosome segregation is abnormal, cell death is caused, and the DNA binding is eliminated. In addition, the RNAi method suppresses the occurrence of G-stretch junction factors in the RNAi system. This study was conducted to investigate the relationship between DNA replication mechanism and DNA replication at early stage of cleavage.