血管弛緩薬による血管の細胞増殖制御に関する細胞分子生物学的研究:特に、環状ヌクレオチド情報伝達系の果たす役割について

血管舒张剂控制血管细胞增殖的细胞和分子生物学研究：特别是环核苷酸信号转导系统所起的作用

• 批准号: 07833008
• 负责人: 小林 誠
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07833008/
• 关键词: 血管平滑筋; 細胞増殖; 細胞周期; 血管弛緩薬; 環状ヌクレオチド; 細胞生物学; 分子生物学; カルシウムイオン

ラット大動脈平滑筋細胞の初代培養細胞を用いて、血管弛緩薬が血管平滑筋細胞の細胞周期制御におよぼす影響について検討した。細胞周期は、細胞周期特異的核抗原に対する単クローナル抗体の多重免疫蛍光染色によって、単一細胞レベルで同定した。また、逆転写PCR法によってプロトオンコジーンの発現を検討した。24時間の無血清培養によって、G_0期細胞を得た。血管弛緩薬・作動薬について以下の結果を得た。1.細胞内サイクリックGMPを増加させて血管を弛緩させるニトログリセリンは、G_0期細胞の細胞周期やc-fos mRNAの発現には影響がない。一方、細胞内サイクリックAMPを増加させて血管を弛緩させるフォルスコリンは、細胞周期をG_0期⇒G_1期へ移行させ、c-fos mRNAの発現を増加させる。これらのフォルスコリンの効果は、Aキナーゼの活性化を介するものであり、また、チロシンリン酸化の関与が示唆された。ニトログリセリンおよびフォルスコリンは、共に血管平滑筋細胞の細胞質カルシウム濃度を低下させる。2.新規降圧ペプチドであるアドレノメデュリンは、血管平滑筋の細胞質カルシウム濃度を減少させ、また、G蛋白質の活性化を介して、収縮装置のカルシウム感受性を低下させて、血管弛緩を引き起こす。さらに、アドレノメデュリンは、サイクリックAMP/Aキナーゼ系の活性化を介して、細胞周期をG_0期⇒G_1期へ移行させ、c-fos mRNAの発現を増加させる。この細胞増殖作用は、細胞質カルシウム濃度に非依存性である。3.エンドセリン-1およびアンギオテンシン-IIは、血管平滑筋の細胞周期をG_1期⇒S/M期に進行させるプログレッション増殖因子である。また、UTPは、P2U受容体の活性化を介して、内皮依存性弛緩を引き起こすが、同時に血管平滑筋細胞のプログレッション増殖因子として作用する。

Study on the effects of vascular relaxant on cell cycle regulation of vascular smooth muscle cells in primary culture Cell cycle, cell cycle specific nuclear antigen pairs, multiple immunofluorescence staining, single cell cycle identification The reverse transcription PCR method was used to detect the gene expression. 24-hour serum-free culture was used to obtain cells in G_0 phase. The following results were obtained from the vasomotor action. 1. Cell cycle and c-fos mRNA expression in G_0 cells are affected by the increase of intracellular GMP and vascular relaxation. The expression of c-fos mRNA increased during cell cycle transition from G_0 to G_1. The results of this study are as follows: 1. The concentration of cytosol in vascular smooth muscle cells was decreased. 2. The new regulation reduces the plasma concentration of vascular smooth muscle, reduces the activation of G protein, reduces the sensitivity of contraction device, and causes vascular relaxation. In addition, the expression of c-fos mRNA increased during the transition from G_0 to G_1 of the cell cycle. Cell proliferation is concentration independent of cytosol concentration. 3. The cell cycle of vascular smooth muscle was changed from G1 to S/M. UTP mediates the activation of P2U receptors, induces endothelium-dependent relaxation, and simultaneously acts as a promoter of vascular smooth muscle cells.

项目成果

Seguchi, H. et al.: "The mechanism of relaxation induced by atrial natriuretic peptide in the porcine renal artery." Br. J. Phamacol.(in Press).

Seguchi, H. 等人：“猪肾动脉中心房钠尿肽诱导的舒张机制。”

Kureishi, Y. et al.: "Adrenomedullin decreases both cytosolic Ca^<2+> concentration and Ca^<2+>-sensitivity in pig coronary arterial smooth muscle." Biochem. Biophys. Res. Commun.212. 572-579 (1995)

Kureishi, Y. 等人：“肾上腺髓质素可降低猪冠状动脉平滑肌中的胞质 Ca^2 浓度和 Ca^2 敏感性。”

Jahan, H. et al.: "Both endothelin-1 and anogiotensin-II act as progression growth factors but not competence growth factors in vascular smooth muscle cells in primary culture." Eur. J. Pharmacol.295. 261-269 (1996)

Jahan, H. 等人：“在原代培养的血管平滑肌细胞中，内皮素-1 和血管紧张素-II 都充当进展生长因子，但不是能力生长因子。”

Miyagi, Y. et al.: "Nucleotide receptor links to cytosolic calcium transient and release of vasorelaxing factor in bovine endothelial cells in situ." J. Physiol. (London). (in press).

Miyagi, Y. 等人：“核苷酸受体与牛内皮细胞原位胞质钙瞬变和血管舒张因子的释放有关。”

Seguchi, H. et al.: "Autocrine regulation of the renal arterial tone by adrenomedulin." Biochem. Biophys. Res. Commun.212. 619-625 (1995)

Seguchi, H. 等人：“肾上腺髓质素对肾动脉张力的自分泌调节。”