乳癌・卵巣癌の発生・悪性化における新規アダプター分子PB36の機能解析

新型接头分子PB36在乳腺癌和卵巢癌发生发展及恶性肿瘤中的功能分析

基本信息

批准号：
14657038
负责人：
烏山一
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの研究で、プロB細胞刺激によってチロシンリン酸化される分子量36kDの分子としてタンパク質精製、遺伝子クローニングした新規分子TPP36(旧仮称PB36)に関して、作製した抗体を用いて生化学的解析をおこない、(1)TPP36がほぼすべての組織で発現していること、(2)TPP36には分子量32kDのスプライシングバリアント(TPP32と命名)が存在すること、(3)TPP36/32がAblによって選択的にリン酸化されることを明らかにした。他の研究者によって、TPP36遺伝子のヒトホモローグH41遺伝子の発現が悪性の乳癌や卵巣癌において非常に亢進していることが報告されたことから、H41/TPP36の発現亢進と癌の悪性化との関連に注目し、因果関係を解析した。Ohらは癌遺伝子ErbB-2を過剰発現させた乳癌細胞株と元の細胞株での遺伝子発現パターンをmRNAレベルで解析してH41が前者で過剰発現していると報告している。しかし、彼らと同じ乳癌細胞株を用いて、ErbB-2を過剰発現させた場合とさせない場合におけるH41/TPP36の発現量をmRNAならびにタンパク質レベルで比較検討した結果、有意な差は認められなかった。また、卵巣癌細胞株を用いた解析でもErbB-2を過剰発現にともなうH41/TPP36の有意な発現亢進は認められなかった。OhらはErbB-2を過剰発現させた細胞株を得るために、繰り返し遺伝子導入ならびに細胞選択をおこなっており、その過程でH41/TPP36高発現の細胞株が得られた可能性が高い。H41/TPP36高発現が細胞の生存・増殖に有利に作用した可能性も否定できない。昨年度構築したTPP36ターゲッティングベクターを用いてTPP36ノックアウトマウスの樹立に成功し、現在、TPP36の生体内での機能を解析中である。

Research up until last year, biochemical analysis was performed on the novel molecule TPP36 (formerly PB36) that was purified and gene cloned as a molecule with a molecular weight of 36kD that is tyrosine phosphorylated by pro-B cell stimulation, using the antibodies produced, revealing that (1) TPP36 is expressed in almost all tissues, (2) TPP36 has a molecular weight of 32KD（命名为TPP32），（3）TPP36/32被ABL选择性地磷酸化。其他研究人员报告说，TPP36基因的人类同源物H41基因在恶性乳腺癌和卵巢癌中的表达高度增强，并通过重点关注H41/TPP36的表达增加与恶性癌之间的关联来分析因果关系。哦，等。分析了在mRNA水平和原始细胞系中过表达癌基因ERBB-2的乳腺癌细胞系中的基因表达模式，报告说H41在前者中过表达。但是，当比较H41/TPP36的表达水平，并且使用与其中的乳腺癌细胞系相同的乳腺癌细胞系未用ERBB-2表达时，在mRNA和蛋白质水平上比较了H41/TPP36的表达水平，没有发现显着差异。此外，使用卵巢癌细胞系进行分析显示，由于ERBB-2的过表达，H41/TPP36的表达没有显着增加。哦，等。为了获得过表达ERBB-2的细胞系反复转导基因和选定的细胞，并且在此过程中可能获得了高表达H41/TPP36的细胞系。不能排除H41/TPP36的高表达可能在细胞存活和增殖方面具有优势。我们使用去年构建的TPP36靶向向量成功建立了TPP36敲除小鼠，目前正在分析TPP36的体内功能。