权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

系列特異的細胞消去法を応用した免疫細胞の生体内機能解析

使用谱系特异性细胞消除方法对免疫细胞进行体内功能分析

基本信息

批准号：
18659109
负责人：
烏山一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

系列特異的細胞消去法による免疫細胞の機能解析のシステムを立ち上げるためのモデルスタディとして、これまで機能解析がほとんど進んでいない好塩基球を標的とした好塩基球欠損マウスの樹立を目標に研究を進めた。前年度の研究で、BACクローン上で相同組み換え技術を応用して、好塩基球特異的に発現しているプロテアーゼmMCP-8をコードする遺伝子の蛋白コード領域をジフテリア毒素遺伝子あるいは緑色蛍光色素(GFP)遺伝子に置換したコンストラクトを作製した。本年度は、緑色蛍光色素遺伝子に置換したコンストラクトをマウス受精卵に導入し、BACトランスジェニックマウスの樹立を試みた。生まれてきた子マウスの尾DNAの解析から、低頻度ながら、BAC由来遺伝子が組み込まれた子マウス数匹を得た。それらのマウスの末梢血をフローサイトメトリーで解析したところ、いずれのマウスにおいてもCD49b陽性FcεRI陽性の好塩基球におけるGFPの発現が確認されなかった。そこで、mMCP-8遺伝子を含む別のBACクローンを用いて、GFP置換コンストラクトを作製しなおした。このコンストラクトをin vitroでマウス骨髄細胞に導入したところ、好塩基球特異的にGFPが発現されることが確認された。そこでこのコンストラクトをマウス受精卵に導入したところ、生まれてきた子マウスの一部で、末梢血中の好塩基球におけるGFPの発現が確認された。現在、この好塩基球GFP陽性マウスの子孫を育成中であり、これらのマウスで好塩基球特異的なGFP発現が再度確認されれば、GFPの代わりにジフテリア毒素遺伝子を組み込んだBACコンストラクトを作製して、マウス受精卵に導入する予定である。

A series of cell-specific elimination methods are used to analyze the function of immune cells. In the previous year's study, BAC researchers used the same set of protein exchange techniques to develop a novel protein exchange system for green fluorescent pigment (GFP) gene. This year, the green pigment gene is replaced by the BAC gene. The DNA analysis of the tail of the gene was carried out at a low frequency, and the DNA of the BAC gene was analyzed at a high frequency. The expression of GFP in the peripheral blood was confirmed by CD49b positive FcεRI positive. The mMCP-8 gene contains the BAC gene and GFP gene. The expression of GFP in vitro was confirmed. The expression of GFP was confirmed in part by the introduction of the fertilized egg and the production of the fertilized egg. Now, the descendants of this GFP positive gene are being bred, and the GFP specific gene is being reconfirmed. The GFP generation is being reconfirmed, and the BAC gene is being controlled, and the zygote is being introduced.

项目成果

期刊论文数量（58）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

好塩基球による新たな慢性アレルギー炎症誘発機構

嗜碱性粒细胞诱导慢性过敏性炎症的新机制

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
感染・炎症・免疫 36:1
影响因子：
0
作者：
Yamagishi SI;Ogasawara S;Mizukami H;Yajima N;Wada RI;Sugawara A;Yagihashi S.;烏山一
通讯作者：
烏山一

好塩基球に選択的に発現する穎粒酵素に対する特異抗体の樹立とその応用

嗜碱性粒细胞选择性表达的粟粒状酶特异性抗体的建立及其应用

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
宇賀神つかさ;小島利之;小畑一茂;辻村祐佑;向井香織;河野洋平;峯岸克行;烏山一
通讯作者：
烏山一

好塩基球が主役を演じる慢性アレルギー炎症

嗜碱性粒细胞起主导作用的慢性过敏性炎症

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
アレルギー・免疫
影响因子：
0
作者：
向井香織;烏山一
通讯作者：
烏山一

Novel mechanism of chronic allergic inflammation; pivotal role of basophils.

慢性过敏性炎症的新机制；

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
向井香織;烏山一;烏山一;烏山一;Karasuyama H.
通讯作者：
Karasuyama H.

Basophils play a pivotal role in immunoglobulin G-but not immunoglobulin E-mediated systemic anaphylaxis.

嗜碱性粒细胞在免疫球蛋白 G 介导的全身过敏反应中发挥关键作用，但在免疫球蛋白 E 介导的全身性过敏反应中则不然。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Immunity (印刷中)
影响因子：
0
作者：
Tsujimura;Y.;Obata;K.;Mukai;K.;Shindou;H.;Yoshida;M.;Nishikado;H.;Kawano;Y.;Minegishi;Y.;Shimizu;T. and Karasuyama;H.
通讯作者：
H.