HCV VectorによるHCV感染過程の制御分子の同定
使用HCV载体鉴定调节HCV感染过程的分子
基本信息
- 批准号:14657129
- 负责人:
- 金额:$ 2.18万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2004
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は、新たなHCV増殖系であるHCV replicon系を応用して、細胞内でのHCV-RNA遺伝子複製過程を制御する分子群を同定することを目的として行われ、今年度次の成果を得た。1.HC-J4株から独自に構築したレプリコンにおいて、NS5A領域の特定のアミノ酸変異を有するクローンが高レベルのゲノム増殖を生じることを明かにした(J Viral Hepatitis 2004 in press)。2.キメラ・リポーター発現レプリコンを用いたウイルス増殖定量システムを構築し、インターフェロン、リバビリン等の薬剤を用いたウイルス増殖抑制効果の定量的解析の結果を報告した(J Infect Dis2004 in press)。3.宿主遺伝子を特異的に破壊するsmall interfering RNA(siRNA)の効果を解析するためHCVゲノムを標的とするsiRNAを構築し、レプリコン発現細胞に導入したところ、強い遺伝子破壊効果(最大96%)が認められた。さらに、細胞内でヘアピン型siRNAを発現するDNAプラスミドベクターを構築し抑制効果を確認した。4.インターフェロン誘導遺伝子の発現を制御するinterferon regulatory factor(IRF)1及びIRF-3を遺伝子導入することにより、レプリコン増殖が著明に抑制された。またIRF-3をsiRNAにより抑制したところHCV増殖が上昇し、細胞内においてIRFの機能がウイルス持続感染増殖に密接に関与することを見いだした(論文投稿中)。本研究により同定される分子群はいずれもHCV研究あるいは治療開発の新しい分野への展開が期待できるものであり、今後さらにウイルス増殖に関与する宿主蛋白の同定、抗ウイルス療法の新たな標的分子の探索を遂行して行く。
は this study, a new た な HCV raised colonization department で あ る HCV replicon system を 応 with し て, intracellular で の HCV - RNA heritage 伝 son replication process を suppression す る を molecular group with fixed す る こ と を purpose と し て line わ れ, our times の を た. 1. HC - J4 strains か ら に alone to construct し た レ プ リ コ ン に お い て, NS5A の specific の ア ミ ノ acid - different を have す る ク ロ ー ン が high レ ベ ル の ゲ ノ ム raised colonization を raw じ る こ と を Ming か に し た (J Viral Hepatitis in press 2004). 2. The キ メ ラ · リ ポ ー タ ー 発 now レ プ リ コ ン を with い た ウ イ ル ス raised yield quantitative シ ス テ ム を constructing し, イ ン タ ー フ ェ ロ ン, リ バ ビ リ ン etc. の 薬 tonic を い た ウ イ ル ス raised colonization unseen fruit の quantitative の analytical results を reports し た (J Infect Dis2004 in press). 3. The host but 伝 son を specific に broken 壊 す る small interfering RNA (siRNA) の unseen fruit を parsing す る た め HCV ゲ ノ ム を mark と す る siRNA を constructing し, レ プ リ コ ン 発 cell に now import し た と こ ろ, strong い heritage 伝 son broken 壊 unseen fruit (96%) が recognize め ら れ た. さ ら に, intracellular で ヘ ア ピ ン type siRNA を 発 now す る DNA プ ラ ス ミ ド ベ ク タ ー を build し inhibition of unseen fruit を confirm し た. 4. イ ン タ ー フ ェ ロ ン induced heritage 伝 son の 発 now を suppression す る interferon regulatory factor and び IRF (IRF) 1-3 を heritage 伝 son import す る こ と に よ り, レ プ リ コ ン raised colonization が zhao Ming に inhibit さ れ た. ま た IRF - 3 を siRNA に よ り inhibit し た と こ が rise し ろ HCV raised colonization, intracellular に お い て IRF の function が ウ イ ル ス hold 続 infection raised colonization に contact に masato and す る こ と を see い だ し た (in paper submitted). This study に よ り with fixed さ れ る molecular group of は い ず れ も HCV research あ る い は treatment open 発 の new し い eset へ の expand が expect で き る も の で あ り, future さ ら に ウ イ ル ス raised colonization に masato and す る host protein の with fixed, resisting ウ イ ル ス therapy の new た な target molecules の explore を carries out し く て line.
项目成果
期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Sakamoto N, Yokota T, et al.: "Inhibition of intracellular hepatitis C virus replication by synthetic and vector-derived siRNAs"EMBO Roports. 4. 602-608 (2003)
Sakamoto N、Yokota T 等人:“通过合成和载体衍生的 siRNA 抑制细胞内丙型肝炎病毒复制”EMBO Roports。
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Sakamoto N, et al.: "Synergistic inhibition of intracellular hepatitis C virus replication by combination of ribavirin and interferon-alpha"J Infect Dis. in press. (2004)
Sakamoto N 等人:“利巴韦林和干扰素-α 组合对细胞内丙型肝炎病毒复制的协同抑制”J Infect Dis。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Maekawa S, Sakamoto N, et al.: "Introduction of NS5A Mutations Enables Subgenomic HCV-Replicon Derived from Chimpanzee-Infectious HC-J4 Isolate to Replicate Efficiently in Huh-7"J Viral Hepatitis. (in press). (2004)
Maekawa S、Sakamoto N 等人:“NS5A 突变的引入使得源自黑猩猩感染性 HC-J4 分离株的亚基因组 HCV 复制子能够在 Huh-7 病毒性肝炎中高效复制”。
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Sakamoto N. et al.: "Specific inhibition of hepatitis C virus replication by cyclosporin A"Biochem Biophys Res Com. 313. 42-47 (2004)
Sakamoto N. 等人:“环孢菌素 A 对丙型肝炎病毒复制的特异性抑制”Biochem Biophys Res Com。
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Miyasaka Y, Sakamoto N, et al.: "Hepatitis C virus NS5A protein inhibits TNF-alpha mediated apoptosis in HUH7 Cells"J Infect Dis. 188. 1537-1544 (2003)
Miyasaka Y、Sakamoto N 等人:“丙型肝炎病毒 NS5A 蛋白抑制 HUH7 细胞中 TNF-α 介导的细胞凋亡”J Infect Dis。
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High-risk stigmataを有するIPMN症例の自然史の検討
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長谷川 浩之;深澤 光晴;高野 伸一;進藤 浩子;高橋 英;川上 智;深澤 佳満;早川 宏;倉富 夏彦;島村 成樹;吉村 大;今川 直人;榎本 信幸 - 通讯作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
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- 作者:
高田ひとみ;大澤玲於奈;小宮山泰之;中岫奈津子;村岡 優;鈴木雄一朗;佐藤 光明;井上 泰輔;前川 伸哉;榎本 信幸 - 通讯作者:
榎本 信幸
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- DOI:
- 发表时间:
2021 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
倉富 夏彦;高野 伸一;深澤 光晴;進藤 浩子;高橋 英;深澤 佳満;川上 智;早川 宏;島村 成樹;吉村 大;今川 直人;前川 伸哉;榎本 信幸 - 通讯作者:
榎本 信幸
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使用下一代测序分析 NS3 和 NS5A 耐药突变体及其与 simeprevir 或 telaprevir 三联疗法疗效的关系
- DOI:
- 发表时间:
2014 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
渡辺貴子,朝比奈 靖浩;中川 美奈;柿沼 晴;井津井 康浩;前川 伸也;三浦 美香;榎本 信幸;坂本 直哉;渡辺 守 - 通讯作者:
渡辺 守
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