C型肝炎ウイルスのインターフェロン抵抗性の分子生物学的機序の解明

阐明丙型肝炎病毒干扰素抵抗的分子生物学机制

• 批准号: 08670565
• 负责人: 榎本 信幸
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670565/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; インターフェロン; NS5A遺伝子; 酵母

我々は、HCVのinterferon抵抗性がHCVのNS5A領域のアミノ酸配列によって決定されることを解明してきた。本研究では、このinterferon抵抗性とNS5Aの関連のメカニズムの解明および臨床応用を目的とした。NS5Aと相互作用する肝細胞蛋白はHCVのinterferon抵抗性に重要な役割をはたしていると考えられ、本研究ではyeast two-hybrid systemを用いてこの蛋白のscreeningを行った。すなわち、NS5Aを酵母GAL4のDNA binding domainとの融合蛋白として発現させ、これをtargetとしてGAL4 activation domainと融合させたhuman liver cDNA libraryをscreeningした。その結果、Rac,RabなどのGTP結合蛋白質、Grb2などのsignal伝達分子、proteasomeなどがNS5Aと相互作用しうることが判明した。今後、これらの蛋白質とinterferon抵抗性の関連の解明を行う予定である。NS5Aのアミノ酸変異の臨床的意義については、まずHCV-1bについて更に多数例での解析を進めた。その結果、NS5A2209-2248にアミノ酸変異が増加するほどinterferonの著効率は増大し、この領域を治療前に検索することが治療効果の予測に有用であることが判明した。さらに、HCV genotype 2についても、NS5Aとinterferon治療効果の関連を検討した。HCV-2においても、HCV-1bと同様にNS5Aにアミノ酸変異が増大するほど血中HCV-RNA量は低下し、interferonに対する感受性は増大した。興味深いことに、HCV-2bの著効率はHCV-2aに比して有意に低かったが、これはHCV-2bではNS5Aの変異の少ない症例がHCV-2aよりも高頻度に認められることが原因と考えられた。

I 々 は, HCV の interferon resistance が HCV の NS5A field の ア ミ ノ acid with column に よ っ て decided さ れ る こ と を interpret し て き た. This study で は, こ の interferon resistance と NS5A の masato even の メ カ ニ ズ ム の interpret お よ び clinical 応 purpose を と し た. Interaction between NS5A と す る は HCV liver cell protein の interferon resistance に important cut を な service は た し て い る と exam え ら れ, this study で は yeast two hybrid system - を with い て こ の protein の screening line を っ た. GAL4 す な わ ち, NS5A を yeast の DNA binding domain と の fusion protein と し て 発 now さ せ, こ れ を target と し て GAL4 activation domain と fusion さ せ た human liver cDNA libraryをscreening た. そ の results, Rac, Rab な ど の GTP binding protein, made Grb2 な ど の signal 伝 molecules, proteasome な ど が NS5A と interaction し う る こ と が.at し た. In the future, the <s:1> association <e:1> of <s:1> れら <s:1> protein とinterferon resistance will be clarified を and う determined である. NS5A の ア ミ ノ acid - different clinical significance に の つ い て は, ま ず HCV - 1 b に つ い て に most cases more で の parsing を into め た. そ の results, NS5A2209-2248 に ア ミ ノ acid - different が raised plus す る ほ ど interferon は raised large し の the working rate, こ を の field treatment before に 検 cable す る こ と が treatment services fruit の useful to measure に で あ る こ と が.at し た. Youdaoplaceholder0, HCV genotype 2に に て て, NS5Aとinterferon therapeutic effect <s:1> is related to を検 and た. HCV - 2 に お い て も, HCV with others - 1 b と に NS5A に ア ミ ノ acid - が raised great す る ほ ど HCV - RNA content in blood は し, interferon に す seaborne る susceptibility は raised large し た. Takes deep い こ と に, HCV - 2 b の は HCV - 2 a sharper rate than し に て intentionally に low か っ た が, こ れ は HCV - 2 b で は NS5A の - different の な less cases い が HCV - 2 a よ り も high frequency に recognize め ら れ る こ と が reason と exam え ら れ た.

项目成果

Kurosaki M.Enomoto N.et al.: "Analysis of Genotyres and Amino Acid Residnes 2209 to 2248 of the NS5A Region of Mepstitis C Vines in Relation to the Respouse to Interferon-β Therapy" Hepatology. (in press). (1997)

Kurosaki M.Enomoto N.等人：“丙型胃炎藤蔓 NS5A 区域的基因轮胎和氨基酸残基 2209 至 2248 与干扰素-β 治疗反应的分析”（正在出版）。