小胞体ストレスで誘導される分子シャペロンを標的としたC型肝炎治療の開発

开发针对内质网应激诱导的分子伴侣的丙型肝炎治疗方法

• 批准号: 16659185
• 负责人: 榎本 信幸
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659185/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; サイクロスポリン; 小胞体ストレス; レプリコン; 分子シャペロン

サイクロスポリンAのHCV増殖抑制が、分子シャペロンであるサイクロフィリンの活性阻害によることを証明するために、特異的遺伝子発現抑制法であるsiRNAを用いてサイクロスポリンAの標的宿主遺伝子であるサイクロフィリン遺伝子発現の抑制を行いHCV増殖への影響を解析した。その結果、小胞体蛋白の分子シャペロンであるサイクロフィリンBのsiRNAによるノックダウンがHCV増殖を抑制することを確認し、Gastroenteologys誌に論文として発表した。種々のERストレスを惹起する薬剤、すなわち蛋白の糖鎖付加を阻害するツニカマイシン、小胞体内カルシウム濃度を低下させるタプシガルギンなどのHCV増殖に与える影響を解析し、ERストレスの中でも小胞体からのカルシウムの枯渇がHCV増殖を抑制することを見出した。また小胞体内に蓄積しERストレスを惹起すると考えらるHCV構造蛋白を発現し、これまでのHCV非構造蛋白のみを発現するHCVレプリコンよりも生体内のHCV増殖をより忠実に再現するHCV全長レプリコンとして、JFH株による培養細胞増殖系の導入を行った。今後、これによりERストレスとHCV増殖の関連を検討する予定である。ATF6はERストレスすなわち小胞体での異常蛋白の蓄積に反応して、小胞体より核に移行しERストレス反応遺伝子群の発現を誘導するERストレス制御の最も上流に位置する転写因子であり、実際にサイクロスポリンによりHCV増殖細胞内で発現が亢進することを見出した。今後、ATF6により誘導されるERストレス反応遺伝子群のなかの如何なる遺伝子がHCV増殖において本質的役割をになっているかを明らかとするため、DNAマイクロアレイを用いた網羅的解析により、HCV増殖下で活性化される遺伝子のなかで、ATF6反応性遺伝子を同定する予定である。

サ イ ク ロ ス ポ リ ン inhibit が の HCV raised A colonization, molecular シ ャ ペ ロ ン で あ る サ イ ク ロ フ ィ リ ン の active resistance against に よ る こ と を prove す る た め に, specific but 伝 発 inhibition method now で あ る siRNA を with い て サ イ ク ロ ス ポ リ ン の mark A legacy host 伝 son で あ る サ イ ク ロ フ ィ リ ン heritage 伝 発 の restrain line を い HC now V enrichment へ へ impact を Analysis of た. そ の results, small cell body protein molecular シ の ャ ペ ロ ン で あ る サ イ ク ロ フ ィ リ ン B の siRNA に よ る ノ ッ ク ダ ウ ン が を inhibit HCV rights colonization す る こ と を confirm し, Gastroenteologys tzu に paper と し て 発 table し た. Kind of 々 の ER ス ト レ ス を provoked す る 薬 tonic, す な わ ち protein の sugar plus lock を resistance against す る ツ ニ カ マ イ シ ン, small cell in the body カ ル シ ウ ム low concentration を さ せ る タ プ シ ガ ル ギ ン な ど に の HCV raised colonization and え る influence を analytical し, ER ス ト レ ス の in で も small cell body か ら の カ ル シ ウ ム の withered 渇 が を inhibit HCV rights colonization す る こ Youdaoplaceholder0 see た. ま た small cell in the body accumulation し に ER ス ト レ ス を provoked す る と exam え ら る HCV structural proteins を 発 し, こ れ ま で の HCV non-structural protein の み を 発 now す る HCV レ プ リ コ ン よ り も born in vivo の HCV raised colonization を よ り loyalty be に reappearance す る HCV span レ プ リ コ ン と し て, JFH に よ る culture cell raised colonization is の import を Line った. In the future, the <s:1> association of れによ れによ ERストレスとHCV proliferation を検 shall be discussed する to be determined である. ATF6 は ER ス ト レ ス す な わ ち small cell body で の abnormal accumulation of protein の に anti 応 し て, small cell body よ り nuclear に transitional し ER ス ト レ ス anti 応 heritage 伝 subgroup の 発 now を induced す る ER ス ト レ ス suppression の も most polite に position す る planning write factor で あ り, be interstate に サ イ ク ロ ス ポ リ ン に よ り HCV rights within the cells で 発 now が hyperthyroidism す る こ Youdaoplaceholder0 see た. Induced in the future, ATF6 に よ り さ れ る ER ス ト レ ス anti 応 heritage 伝 subgroup の な か の how な る heritage 伝 son が HCV raised colonization に お い て cut the nature of the service を に な っ て い る か を Ming ら か と す る た め, DNA マ イ ク ロ ア レ イ を with い た snare parsing に よ り, HCV rights under colonization で activeness さ れ る heritage 伝 son の な か で, ATF6 Youdaoplaceholder0 sexual heritage 伝 offspring を co-determinate する predeterminate である.

项目成果

Specific inhibition of hepatitis C virus replication by cyclosporin A

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2003.11.080
• 发表时间: 2004-01-02
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Nakagawa, M;Sakamoto, N;Watanabe, M
• 通讯作者: Watanabe, M

Changes of HCV quasispecies during combination therapy with interferon and ribavirin

• DOI: 10.1016/j.hepres.2004.02.014
• 发表时间: 2004-06-01
• 期刊: HEPATOLOGY RESEARCH
• 影响因子: 4.2
• 作者: Ueda, E;Enomoto, N;Watanabe, M
• 通讯作者: Watanabe, M

Introduction of NS5A mutations enables subgenomic HCV replicon derived from chimpanzee‐infectious HC‐J4 isolate to replicate efficiently in Huh‐7 cells

• DOI: 10.1111/j.1365-2893.2004.00525.x
• 发表时间: 2004-09
• 期刊: Journal of Viral Hepatitis
• 影响因子: 2.5
• 作者: S. Maekawa;N. Enomoto;N. Sakamoto;M. Kurosaki;E. Ueda;T. Kohashi;H. Watanabe;C.‐H. Chen;T. Yamashiro;Y. Tanabe;N. Kanazawa;M. Nakagawa;C. Sato;M. Watanabe

Synergistic inhibition of intracellular hepatitis C virus replication by combination of ribavirin and interferon-alpha

利巴韦林和干扰素-α组合协同抑制细胞内丙型肝炎病毒复制

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Infect Dis 189
• 作者: Sakamoto N;et al.
• 通讯作者: et al.

Regulation of hepatitis C virus replication by interferon regulatory factor 1

• DOI: 10.1128/jvi.78.18.9713-9720.2004
• 发表时间: 2004-09-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Kanazawa, N;Kurosaki, M;Watanabe, M
• 通讯作者: Watanabe, M