超微小ビーズ担体を用いた食物抗原・ペプチドに対する生体側受容体の単離

使用超细珠载体分离食品抗原和肽的生物受体

• 批准号: 14657128
• 负责人: 渡辺 守
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657128/
• 关键词: アレルギー; 食物アレルギー; アフィニティクロマトグラフィー; ナノテクノロジー; 粘膜免疫; 腸管上皮細胞; 腸内細菌; 創薬

本研究では腸管粘膜免疫組織において渡辺らの研究組織が独自に見いだした調節機構の考え方を導入するとともに、半田らが開発したナノテクノロジー「超微小ビーズ担体(ミラクルビーズ)」を応用して、食物アレルギー発症機構、食物抗原・腸内細菌抗原/ペプチドに対応する受容体、免疫統御の分子機構などを明らかとし、その特殊性を利用した新しいアレルギーに対する抑制戦略を実用化しようとする萌芽的研究を行った。本年度の研究では、食物抗原・腸内細菌抗原/ペプチドの「ミラクルビーズ」への固定化、およびそれを用いた生体受容体精製の条件設定のためのモデル実験系として、スチレンを芯に持ち、表面をグリシジルメタクリレートで覆われたSGビーズをアフィニティクロマトグラフィーの担体として構築した。SGビーズ表面に組換え大腸菌毒素をリンカーを介して固定化し、それを用いて、腸管上皮細胞粗抽出液からじかに毒素の標的となる生体分子をアフィニティ精製した。その結果、大腸菌毒素のアフィニティ精製画分に沢山の夾雑物が含まれ、毒素と選択的に結合する生体分子を検出することは難しいことがわかり、いくつかの改良を試みた。問題点となる毒素の固定化方法や固定化量を改善することで、毒素に結合するいくつかの蛋白が得られた。更に同様にして、腸管上皮細胞から腸管特異的低分子薬剤5ASAおよびそばアレルギーの原因ペプチドなどの生体内受容体の分離に成功し、いづれも現在、蛋白を解析中である。今回の研究により大腸菌毒素や食品中に含まれる物質に対する生体側の受け手である腸管上皮細胞上のレセプターを単離同定する技術が確立されたことは大きな進展であり、食物アレルギー疾患の発症機構を解明して、それらの治療に結びつく知見や情報が得られるものと期待される。本研究により将来的には難治性アレルギー疾患の治療に有効な創薬の開発が十分期待できる。

In this study, the intestinal mucosa immune tissue was studied independently, and the regulatory mechanism of the intestinal mucosa immune tissue was introduced into the intestinal mucosa immune tissue. The regulatory mechanism of the intestinal mucosa immune tissue was introduced into the intestinal mucosa immune tissue. The regulatory mechanism of the intestinal mucosa immune tissue was introduced into the intestinal mucosa immune tissue. The special characteristics of the new technology are used to suppress the emergence of new technologies. This year's research focused on the immobilization of food antigens and intestinal bacterial antigens, and the setting of conditions for the purification of biological receptors. In addition to the above, the preparation method of the recombinant plasmid was also studied. As a result, coliform toxins are isolated from the purified extract, and the inclusion of coliform toxins in the extract and extract is difficult to detect and improve. The problem is that the immobilization method of toxin can improve the immobilization amount, and the protein can be obtained by binding toxin. In addition, intestinal epithelial cells are isolated from intestinal specific low molecular weight drugs, such as 5ASA and 5ASA. The current research on coliform toxins and substances contained in foods has established techniques for the isolation and identification of coliform toxins on intestinal epithelial cells, and has made great progress in understanding the mechanisms for the development of coliform toxins and food diseases, as well as in the treatment of coliform toxins. This study is expected to lead to the development of innovative drugs for the treatment of refractory diseases.

项目成果

Ezaki T, Watanabe M, et al.: "A specific genetic alteration on chromosome 6 in ulcerative colitis-associated colorectal cancers."Cancer Res. 63. 3747-3749 (2003)

Ezaki T、Watanabe M 等人：“溃疡性结肠炎相关结直肠癌中 6 号染色体上的特定遗传改变。”Cancer Res。

Kanai T, Watanabe M, et al.: "Blockade of B7-H1 suppresses the development of chronic intestinal inflammation."J Immunol. 171. 4156-4163 (2003)

Kanai T、Watanabe M 等人：“阻断 B7-H1 可抑制慢性肠道炎症的发展。”J 免疫学杂志。

Okamoto R, Watanabe M.: "Prospects for regeneration of gastrointestinal epithelia using bone-marrow cells."Trends Mol Med. 9. 286-290 (2003)

Okamoto R, Watanabe M.：“利用骨髓细胞再生胃肠道上皮细胞的前景。”Trends Mol Med。

Okamoto, R, Watanabe, M, et al.: "Damaged epithelia regenerated by bone marrow-derived cells in the human gastrointestinal tract"Nature Med. 8. 1011-1017 (2002)

Okamoto, R、Watanabe, M 等人：“人胃肠道中骨髓来源细胞再生的受损上皮细胞”Nature Med。

Ohkusa T, Watanabe M, et al.: "Improvement in atrophic gastritis and intestinal metaplasia in patients from whom Helicobacter pylori was eradicated"Ann Int Med. 134. 380-386 (2001)

Ohkusa T、Watanabe M 等人：“根除幽门螺杆菌后，患者的萎缩性胃炎和肠化生得到改善”Ann Int Med。