神経堤細胞に由来する血管平滑筋前駆細胞の単離同定と分化系譜の確立

神经嵴细胞来源的血管平滑肌祖细胞的分离鉴定及分化谱系的建立

• 批准号: 14657175
• 负责人: 栗原 裕基
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo (2003)Kumamoto University (2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657175/
• 关键词: 神経堤細胞; 幹細胞; 鰓弓; 血管平滑筋; エンドセリン; 転写因子; 分化制御; 核移植; 胚発生

i)平滑筋前駆細胞の同定と分化における転写因子の役割:血管平滑筋分化に必須であるdHAND遺伝子の導入は、むしろ最終分化を抑制し、この転写因子が分化の中間段階の維持に必要であると考えられたが、その下流遺伝子を同定するため、DNAマイクロアレイを用いてdHANDを強制発現させたEC細胞P19で誘導される遺伝子群を調べた。そのうち、dHAND発現がダウンレギュレートされているET-1遺伝子欠損マウスで発現の抑制されている遺伝子としてカルパイン6遺伝子が同定された。この分子はカルパインファミリーの中でもプロテアーゼ活性を持たないもので機能は不明であるが、強制発現及びRNAiを用いた実験から、この分子が細胞骨格の構築を介して細胞の形態に関与する機能を持つことを明らかにした。現在神経堤細胞や血管平滑筋細胞における役割について検討中である。その他dHANDの下流遺伝子としてPDGF受容体などがマイクロアレイによって同定され、平滑筋への分化過程でも同様の関係があるかどうか解析を進めている。ii)神経堤細胞からの分化過程における核の可塑性に関する研究:神経堤細胞から平滑筋様細胞への分化は培養下で再現可能であるが、この過程で核の可塑性と分化の関係を調べるため、神経堤細胞をドナーとするマウス除核未受精卵への核移植により、初期発生の進行とクローン個体の形成を評価した。これにより、培養神経堤細胞では未分化状態及び平滑筋型アクチンを発現する平滑筋様細胞に分化の進んだ状態ともに、ES細胞に匹敵する初期発生の進行とクローン個体形成能を認めた。これより、神経堤細胞から平滑筋細胞へと分化が進む過程で、その初期段階では未分化細胞同様の核の可塑性をもつことが示され、その分化制御機構における意義が今後の課題になると考えられた。

(i) Regulation of transcription factors in smooth muscle cells during homeostasis and differentiation: introduction of dHAND genes necessary for vascular smooth muscle differentiation, inhibition of final differentiation, regulation of transcription factors necessary for maintenance of intermediate stages of differentiation, and regulation of down-stream genes during homeostasis and DNA stress development in EC cells P19. In addition, it was found that the ET-1 gene was deficient in the inhibition of gene expression and gene expression, and the gene expression was stable. These molecules are involved in the development of cellular structures, cell morphology, and function. Now the nervous system cells and vascular smooth muscle cells are in the middle of the discussion. The relationship between PDGF receptor and its downstream gene is analyzed. ii) Study on nuclear plasticity during neuronal cell differentiation: The possibility of neuronal cell differentiation from smooth muscle cells to reproduce in culture, the regulation of nuclear plasticity during differentiation, the evaluation of neuronal cell differentiation from smooth muscle cells to unfertilized eggs, nuclear transfer, early development, and individual formation. In this way, cultured neurons can be differentiated and smooth muscle cells can be developed. Smooth muscle cells can be differentiated and developed. ES cells can be developed in the early stage of development. In this paper, the significance of nuclear plasticity of undifferentiated cells in the early stage of differentiation and differentiation control mechanism in the future is discussed.

项目成果

Yamaguchi Y: "Identification of multiple novel epididymis-specific -defensin isoforms in humans and mice"J.Immunol.. 169. 2516-2523 (2002)

Yamaguchi Y：“人类和小鼠中多种新型附睾特异性防御​​素亚型的鉴定”J.Immunol.. 169. 2516-2523 (2002)

Kurihara H: "Targeted disruption of adrenomedullin and alphaCGRP genes reveals their distinct biological roles."Hypertens Res.. 26(Suppl). S105-S108 (2003)

Kurihara H：“肾上腺髓质素和 αCGRP 基因的靶向破坏揭示了它们独特的生物学作用。”Hypertens Res.. 26（增刊）。

Imai Y: "Resistance to neointimal hyperplasia and fatty streak formation in adrenomedullin overexpression mice."Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. 22. 1310-1315 (2002)

Imai Y：“肾上腺髓质素过度表达小鼠对新内膜增生和脂肪条纹形成的抵抗。”Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. 22. 1310-1315 (2002)

Ito T: "Inhibitory effect of natriuretic peptides on aldosterone synthase gene expression in cultured neonatal rat cardiocytes."Circulation.. 107. 807-810 (2003)

Ito T：“利钠肽对培养的新生大鼠心肌细胞中醛固酮合酶基因表达的抑制作用。”Circulation.. 107. 807-810 (2003)

Nishimatsu H: "Role of endogenous adrenomedullin in the regulation of vascular tone and ischemic renal injury : studies on transgenic/knockout mice of adrenomedullin gene."Circ.Res.. 90. 657-663 (2002)

Nishimatsu H：“内源性肾上腺髓质素在调节血管张力和缺血性肾损伤中的作用：对肾上腺髓质素基因转基因/敲除小鼠的研究。”Circ.Res.. 90. 657-663 (2002)