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クローン技術を用いた血管細胞分化機構の解明

利用克隆技术阐明血管细胞分化机制

基本信息

批准号：
16659196
负责人：
栗原裕基
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度、ES細胞から血管内皮細胞に分化する諸段階の細胞をドナーとして除核マウス未受精卵に核移植を行い、その後の胚発生率がドナー細胞の分化とともに著しく低下することを見いだした。本年度は、ES細胞の未分化性維持に必須な因子であるOct4の発現動態に注目し、分化に伴うエピジェネティックな変化と核移植後のリプログラミングとの相関を解析すると同時に、体細胞核由来ES細胞(ntES細胞)の特性について検討した。ES細胞のOct4発現は、分化条件2.5日目で既に減少し、プロモーター領域のエピジェネティツクな変化はヒストンH3K9のメチル化→DNAの高メチル化の順に進んだ。核移植後の胚発生率はOct4の発現、ヒストンH3K9のメチル化の増加とともに低下し、DNAメチル化が変化する以前の段階でリプログラミングに対する感受性が変化する可能性が示唆された。一方、PECAM1+のES細胞由来の核移植後胚盤胞より新たにES細胞を樹立し、それらのntES細胞が血管細胞への分化指向性をもっているかどうか,分化方向の特性を有するのかを検討を行った。マーカー遺伝子の発現、胚葉体形成能にはドナーES細胞との間で差は見られなかった。さらに、血管内皮細胞、平滑筋細胞への分化効率はドナーES細胞と変わらず、ドナー細胞の特性が保持されていることを示す結果は得られなかった。以上から、核移植後のリプログラミングに対するドナー核の感受性は分化の初期にヒストン修飾の変化とともに低下すること、ntES細胞が樹立された場合、ドナー細胞による分化指向性への影響は明らかではなく、正常ES細胞と同等の分化能を有することが示唆された。核移植後のリプログラミングに対する感受性と細胞の可塑性、分化の可逆性との関連を検討することにより、細胞分化の新たな側面が明らかになると期待された。

In the past year, ES cells have been differentiated from vascular endothelial cells, and the rate of embryo development after nuclear transfer has been reduced. This year, the factors necessary for the maintenance of undifferentiation of ES cells were studied. The development dynamics of ES cells were analyzed. The characteristics of somatic nuclear-derived ES cells (ntES cells) were investigated. ES cells Oct4 development and differentiation conditions 2.5 days later, both reduced, increased and decreased in the domain of H3K9, and increased in DNA. After nuclear transfer, embryo development rate decreased in Oct4, increased in H3K9, and decreased in DNA. The origin and differentiation orientation of PECAM1 + ES cells after nuclear transplantation were studied. The development of embryo and embryo body can be controlled by ES cells. The differentiation rate of vascular endothelial cells and smooth muscle cells was significantly higher than that of ES cells. The above results show that the sensitivity of nuclear cells to differentiation after nuclear transplantation is reduced in the early stage of differentiation, and that the differentiation orientation of ntES cells is affected by the differentiation orientation of ntES cells. The relationship between plasticity and reversibility of cell differentiation after nuclear transplantation

项目成果

期刊论文数量（25）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Resistin-like molecule beta activates MAPKs, suppresses insulin signaling in hepatocytes, and induces diabetes, hyperlipidemia, and fatty liver in transgenic mice on a high fat diet.

抵抗素样分子β激活MAPK，抑制肝细胞中的胰岛素信号传导，并在高脂肪饮食的转基因小鼠中诱发糖尿病、高脂血症和脂肪肝。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
J.Biol.Chem. 280・51
影响因子：
0
作者：
Viana AY;Sakoda H;et al.;Kushiyama A et al.
通讯作者：
Kushiyama A et al.

Serum concentrations of resistin-like molecules beta and gamma are elevated in high-fat-fed and obese db/db mice, with increased production in the intestinal tract and bone marrow.

在高脂肪喂养和肥胖的 db/db 小鼠中，抵抗素样分子 β 和 γ 的血清浓度升高，肠道和骨髓中的产量增加。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Diabetologia. 48・5
影响因子：
0
作者：
Kojima S;Nakahara T;Nagai N;Muranaga T;Tanaka M;Yasuhara D;Masuda A;Date Y;Ueno H;Nakazato M;Naruo T;Shojima N
通讯作者：
Shojima N

Differential cooperation between dHAND and three different E-proteins.

dHAND 和三种不同 E 蛋白之间的差异合作。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biochem.Biophys.Res.Commun. 323
影响因子：
0
作者：
Chu CP;Qiu DL;Kato K;Kunitake T;Watanabe S;Yu NS;Nakazato M;Kannan H.;Okuno M. et al.;Murakami M
通讯作者：
Murakami M

Id1 Gene Transfer Confers Angiogenic Property on Fully Differentiated Endothelial Cells and Contributes to Therapeutic Angiogenesis

DOI：
10.1161/circulationaha.104.516898
发表时间：
2005-11
期刊：
Circulation
影响因子：
37.8
作者：
Koichi Nishiyama;K. Takaji;Keiichiro Kataoka;Y. Kurihara;M. Yoshimura;A. Kato;H. Ogawa;H. Kurihara
通讯作者：
Koichi Nishiyama;K. Takaji;Keiichiro Kataoka;Y. Kurihara;M. Yoshimura;A. Kato;H. Ogawa;H. Kurihara

Akt-dependent phosphorylation negatively regulates the transcriptional activity of dHAND by inhibiting the DNA binding activity.

Akt 依赖性磷酸化通过抑制 DNA 结合活性来负向调节 dHAND 的转录活性。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Eur.J.Biochem. 271
影响因子：
0
作者：
M.Murakami;et al.
通讯作者：
et al.

DOI：
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構造適応型Deep Belief Network学習法による検診データの学習速度の向上

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通讯作者：
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发表时间：
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Maruyama R;et. al.;栗原裕基
通讯作者：
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发表时间：
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影响因子：
0
作者：
東山大毅;栗原裕基;鎌田真，市村匠，原田俊英;東山大毅;Takumi Ichimura and Shin Kamada;Shin Kamada and Takumi Ichimura
通讯作者：
Shin Kamada and Takumi Ichimura