てんかん原性皮質形成異常におけるCl^-ホメオスタシスとGABA機能異常の分子機構

致癫痫性皮质发育不良中 Cl^-稳态和 GABA 功能障碍的分子机制

• 批准号: 14657229
• 负责人: 福田 敦夫
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657229/
• 关键词: グリシン; クロライドトランスポーター; カハールレチウス細胞; 細胞移動; GABA; 皮質形成異常; てんかん; リーリン; クロライドイオン

1.ヒト皮質異形成組織標本におけるreelin遺伝子発現変化の解析(福田、井上):Reelinは大脳皮質第一層に存在するCajal-Retzius細胞から分泌され、大脳皮質の神経細胞の配置決定に重要な役割を果たしていると考えられる。大脳皮質形成異常は発生異常に基づく神経細胞の配列や形態異常などの組織像を示すので、難治の部分てんかんに対する外科治療により摘出された皮質形成異常標本を用いてreelin遺伝子の発現変化をin situ hybridization組織化学法を用いて検討した。コントロールとして摘出標本内の組織学的な形成異常がない部位を用い、比較定量的な解析を行ったところ、reelin mRNAが形成異常部位において有意に減少していた。2.皮質形成異常動物モデル標本を用いた異常層構造形成過程の解析(福田、井上、窪田、Luhmann):異常な皮質層構造の形成過程における興奮性GABA/グリシン作用の要因について検討するため、ラットの皮質凍結損傷モデルを用いて、異常皮質形成過程で損傷部位へ移動中の細胞におけるGABA_A受容体、グリシン受容体、Cl^-トランスポーターのmRNAの発現量変化をin situ hybridization法を用いて解析した。凍結損傷4日後の移入細胞でNKCC1が増加、逆にKCC2が減少しており、[Cl^-]_i上昇の原因と考えられた。これらの変化は細胞移入時期に一過性であった。また、正常ではグリシン受容体α2 subunitは発達と共に減少するが、凍結損傷部位への移入細胞では著明に増加していた。逆に、発達と共に増加するGABA_A受容体サブユニットは減少傾向にあった。また、凍結損傷部位におけるreelin mRNAの発現は細胞死に伴い消失したが、異常皮質の形成中はreelin陽性細胞は出現せず、形成後に周囲の辺縁帯からの移入とともに、reelinは周囲と同等レベルに回復した。

1. ヒ ト cortical vision in tissue specimens に お け る reelin posthumous son 伝 発 now - の parsing (Mr Fukuda, inoue) : reelin は exist big 脳 cortical layer 1 に す る Cajal cells - Retzius か ら secretion さ れ, big の god 経 脳 cortex cells の configuration decided to cut を に important な service fruit た し て い る と exam え ら れ る. Big 脳 cortex form abnormal は 発 raw abnormal に base づ く god の 経 cells with column や abnormal-looking な ど の organization like を shown す の で, refractory の part て ん か ん に す seaborne る surgery に よ り pick the さ れ た cortex form abnormal use い specimens を て reelin heritage 伝 son の 発 now - the を in situ The hybridization organizational chemical method を uses を て検 to discuss た. コ ン ト ロ ー ル と し て in picking out samples の histological な abnormal formation が な を use い い parts, more quantitative analytical を な っ た と こ ろ, reelin mRNA が form abnormal spot に お い て intentionally に reduce し て い た. 2. The formation of an anomalous cortex animal モ デ を ル specimen with い た abnormal formation layer structure の parsing (Mr Fukuda, inoue, kubota, Luhmann) : abnormal な cortex structure formation の に お け る excitatory GABA / グ リ シ ン role の by に つ い て beg す 検 る た め, ラ ッ ト の freeze injury モ デ ル を with い て, abnormal formation of the cortex Cheng で injury へ mobile の cells に お け る GABA_A let body, グ リ シ ン let body, Cl ^ - ト ラ ン ス ポ ー タ ー の mRNA の 発 now amount - the を in situ hybridization method を with い て parsing し た. Freeze injury after 4 の into cells で NKCC1 が raised addition, inverse に KCC2 が reduce し て お り, [Cl ^ -] _i rise の reason と exam え ら れ た. <s:1> れら transformation れら cell migration period に transient であった. ま た, normal で は グ リ シ ン by let body alpha 2 subunit は 発 da と に reduce total す る が and freeze injury へ の into cells で は with Ming に raised し て い た. Reverse に and occurrence と jointly に increase the するGABA_A acceptor サブユニット に decrease tendency にあった. ま た and freeze injury に お け る reelin mRNA の 発 に は cell death with い disappear now し た が, the formation of abnormal cortical の は reelin positive cells appear は せ ず, forming 囲 に weeks after の 辺 try 帯 か ら の move と と も に, reelin は weeks 囲 と equal レ ベ ル に reply し た.

项目成果

Ikeda, M. et al.: "Differential development of cation-chloride cotransporters and Cl^- homeostasis contributes to differential GABAergic actions between developing rat visual cortex and dorsal lateral geniculate nucleus."Brain Res.. 984. 149-159 (2003)

Ikeda, M. 等人：“阳离子-氯化物协同转运蛋白和 Cl^- 稳态的差异发育有助于发育中的大鼠视觉皮层和背外侧膝状核之间的 GABA 能作用的差异。”Brain Res.. 984. 149-159 (2003)

Differential functional expression of cation-Cl- cotransporter mRNAs (KCC1, KCC2, and NKCC1) in rat trigeminal nervous system

• DOI: 10.1016/j.molbrainres.2004.09.015
• 发表时间: 2005-01-05
• 期刊: MOLECULAR BRAIN RESEARCH
• 作者: Toyoda, H;Yamada, J;Fukuda, A
• 通讯作者: Fukuda, A

Nabekura, J. et al.: "Reduction of KCC2 expression and GABA_A receptor-mediated excitation after in vivo axonal injury."J.Neurosci.. 22. 4412-4417 (2002)

Nabekura, J. 等人：“体内轴突损伤后 KCC2 表达和 GABA_A 受体介导的兴奋减少。”J. Neurosci.. 22. 4412-4417 (2002)

Inoue, K.et al.: "Interaction of neuron-specific K^+-Cl^- cotransporter, KCC2,with brain-type creatine kinase."FEES Lett.. in press. (2004)

Inoue, K.等人：“神经元特异性 K^ -Cl^- 协同转运蛋白 KCC2 与脑型肌酸激酶的相互作用。”FEES Lett.. 正在出版。

Neuroprotective effects of melatonin against anoxia/aglycemia stress, as assessed by synaptic potentials and superoxide production in rat hippocampal slices

• DOI: 10.1111/j.1600-079x.2004.00159.x
• 发表时间: 2004-11-01
• 期刊: JOURNAL OF PINEAL RESEARCH
• 影响因子: 10.3
• 作者: Uchida, K;Samejima, M;Fukuda, A
• 通讯作者: Fukuda, A