遺伝子治療による臓器移植免疫寛容導入:ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬の併用効果

基因治疗在器官移植中诱导免疫耐受：与组蛋白脱乙酰酶抑制剂联合使用的效果

• 批准号: 14657276
• 负责人: 古川 博之
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657276/
• 关键词: CAR; ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤; アデノウイルスベクター; CTLA4Ig; CD40Ig; FK228

ヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)阻害薬であるFR901228(FK228)は、様々な細胞種でその細胞表面のCAR (Coxsackie and adenoviral receptor)の発現を増強させることによりアデノウイルスの感染効率を上昇させる作用を持つことが知られ、遺伝子治療への応用が期待されている。遺伝子治療を臓器移植に応用する場合、免疫抑制物質(CTLA4Ig, CD40Ig)の遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターの投与により移植臓器への免疫寛容を誘導する方法が実験的に効果をあげているが、ベクター自体による副作用を軽減するためには、より少ない量のベクターを用い、十分な遺伝子導入効率を上げることが求められる。昨年度は1.ラット肝分離細胞において、FK228がアデノウイルス(AdLacZ)の感染効率を向上させるか、2.ラット非移植モデルにおいて、FK228が全身投与で用いたアデノウイルス(AdLacZ)導入の発現効率を高めるか、についてX-gal染色を用いて検討したが、有意な向上効果を認めなかった。今年度、肝移植モデルを用いて肝臓グラフトへの遺伝子導入効果の増強が得られるかについて検討した。3.ACIラットからLEWラットヘのhigh responderの組み合わせでの肝移植で、グラフト摘出後、移植までの冷保存期間中にアデノウイルスベクターを肝臓に選択的に導入するex-vivo法を用いた。使用ベクターはAdCD40Ig 1×10^9pfuとし、同時にFK228を0ng/ml,10ng/ml,100ng/ml,1000ng/mlを門脈より注入した。8時間の冷保存の後移植し、生存期間を検討した。その結果、FK228を添加しても生存期間に延長効果は得られなかった。FK228を1000ng/ml加えた群ではむしろ生存期間の短縮を見た。また、4日目に犠牲死させ、肝臓への遺伝子導入効率を免疫染色で検討したが、これについてもFK228を加えた群と各濃度で加えた群に、有意な差を認めなかった。今回の実験では肝移植モデルにおいてもFK228によるアデノウイルスの遺伝子導入効率の向上効果は認められず、移植分野への臨床応用は困難であると思われた。

FR901228(FK228) increases the development of CAR (Coxsackie and adenoviral receptor) on the cell surface of various cell species. In the case of gene therapy for organ transplantation, the method of inducing immune response of organ transplantation by gene combination of immunosuppressive substances (CTLA4Ig, CD40Ig) is to reduce the side effects of autotransplantation, reduce the amount of autotransplantation, and increase the rate of gene introduction. Last year, the infection rate of FK228 in isolated liver cells increased, the infection rate of FK228 in non-transplanted cells increased, the infection rate of FK228 in whole body cells increased, and the infection rate of FK228 in X-gal staining increased. This year, liver transplantation is used to enhance the efficiency of gene introduction. 3. The ex-vivo method was used for the introduction of liver selection during liver transplantation, extraction and cold preservation. AdCD40 Ig 1×10^9pfu was injected simultaneously with FK228 0ng/ml,10ng/ml,100ng/ml and 1000ng/ml into the portal vein. 8 Time of cold preservation after transplantation, survival period to discuss. FK228 is added to extend the duration of the operation. FK228 1000ng/ml plus In addition to FK228, the concentration of FK228 was determined by immunostaining. In the present study, liver transplantation was carried out in the middle of FK228, and the results of gene introduction in liver transplantation were analyzed.