眼組織のバイオイメージング

眼组织的生物成像

• 批准号: 14657452
• 负责人: 梅田 泉
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657452/
• 关键词: 眼組織; バイオイメージング; イメージング; 水晶体; 酸化ストレス; 活性酸素; 細胞内情報伝達; プロテインホスファターゼ; グルタチオン; DCFH-DA

本年度は酸化ストレスならびに細胞内情報伝達の可視化を中心に検討を進めた。1.酸化ストレスの可視化活性酸素のひとつであるO2^-を化学発光によって可視化する試みを検討した。発光試薬として、これまでのルシジェリンに代えてM-PECを用いることにより、O2^-の発光効率を大幅に上昇させることに成功し、脳スライス標本では低酸素-再灌流モデル等でO2^-発生をリアルタイムに画像として捉えることができた。現在、鶏胚水晶体および眼球の組織培養による検討を進めている。また、M-PECは高感度に利点をもつが、酸素によるバックグラウンドの上昇と活性酸素種特異性にまだ難点があり、今後の検討課題と考える。2.細胞内情報伝達の可視化細胞内情報伝達系を培養細胞で可視化する研究は数多くなされているが、組織・器官として観察する試みは少ない。ここでは細胞の増殖や分化、細胞周期等の制御系のひとつであるプロテインキナーゼ・プロテインホスファターゼの酵素活性を可視化することを目的として検討を進めた。タンパク質としての存在や発現を見るのではなく、活性を可視化することで組織状態(健常か病的かなど)の評価が可能ではないかと考えた。生化学的手法によって、水晶体および網膜に高いプロテインホスファターゼ活性が存在することを認め、組織化学的手法で酵素分布の局在等を検討した。現在、活性可視化プローブとして、キナーゼやホスファターゼの基質となる化合物をデザイン、検証している。脂溶性を持たせて膜透過性を高め、細胞内で酵素反応によって水溶性になって組織に保持されることを基本とし、酵素反応が律速段階となるものが必要であり、蛍光と放射性同位元素のどちらでも標識が可能なものを検討している。

This year, the acidizing process has reached the level of intracellular information and can be improved by the center. 1. Acidizing can be used to acidify the active acid, the active acid, the active O2^

项目成果

梅田泉, 中田紘史, 西郡秀夫: "水晶体に存在する複数のプロテインホスファターゼ"あたらしい眼科. (発売予定). (2003)

Izumi Umeda、Hiroshi Nakata、Hideo Nishigori：“晶状体中存在多种蛋白磷酸酶”《新眼科》（计划发布）（2003 年）。

梅田 泉, 他: "グルココルチコイド誘発鶏胚白内障発症時の組織化学的変化"新しい眼科. (in press). (2004)

Izumi Umeda 等人：“糖皮质激素诱导的鸡胚白内障发育过程中的组织化学变化”，《新眼科》（出版中）。

Izumi O.Umeda, et al.: "Predominant phosphatase in the ocular lens regulated by physiological concentrations of magnesium_and_calcium"Life Sciences. (in press). (2003)

Izumi O.Umeda 等人：“眼晶状体中的主要磷酸酶受镁和钙生理浓度的调节”生命科学。

Izumi O.Umeda, et al.: "Multiple Protein Phosphatases Present in the Ocular Lens"Exp.Eye Res.. (in press). (2004)

Izumi O.Umeda 等人：“眼晶状体中存在的多种蛋白磷酸酶”Exp.Eye Res..（正在出版）。

梅田 泉, 他: "水晶体のプロテインホスファターゼ"日本白内障学会誌. (in press). (2004)

Izumi Umeda 等人：“晶状体中的蛋白质磷酸酶”，日本白内障协会杂志（2004 年出版）。