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JVSマウスを用いたミトコンドリアのバイオジェネシスに係わる新規蛋白質因子の解析

使用 JVS 小鼠分析参与线粒体生物发生的新型蛋白质因子

基本信息

批准号：
14658207
负责人：
樋口富彦
金额：
$ 1.86万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

pDsRed-MitoをHeLa細胞にトランスフェクションし,各細胞周期におけるミトコンドリアの形態を共焦点レーザー蛍光顕微鏡により観察し、その3次構造からミトコンドリア量を定量した.その結果,M期で特にダイナミックにミトコンドリアの形態を変化させ2つの娘細胞に分配させていくことが明らかとなった.また,early G2とlate G2の区別はリン酸化ヒストンが点状に染まっているかどうかを基準に行ったが,ミトコンドリアの増生が細胞周期のS期〜G2期にかけて周期特異的に行われることを示唆している.しかもちょうど2倍くらいに増えるように調節される機構が存在することも示唆され,非常に興味深い.PCR-Select SubtractionによりJVSマウス及び対照マウス(c57BL/6J)の心臓間でmRNA発現量に差のある遺伝子を1186clone単離した.発現量の差が特に大きかった,56cloneについてシークエンスを行い,BLASTによりホモロジー検索を行った.その結果,23cloneが既知の遺伝子,15cloneが未知の遺伝子であった.今回のシークエンス結果から,JVSマウスの心臓においてup-regulateしている遺伝子にはribosomal proteinやストレス応答因子が多く含まれていることが分かった.このことから,JVSマウスでは,カルニチン欠乏により脂肪酸代謝障害が起きておりこれが刺激(ストレス)となってこれらの遺伝子が増加したとも考えられる.これらはJVSマウスの心臓におけるミトコンドリアの増生(ミトコンドリアタンパク質の増加)にも関っている可能性があり,大変興味深い.

pDsRed-Mito HeLa cell cycle analysis, cell cycle analysis, confocal microscopy, and quantitative analysis of three structural changes. As a result, the morphology of M phase was transformed into 2 phases, and the distribution of M phase was changed into 2 phases. The difference between early G2 and late G2 is that the cell cycle cycle is S phase to G2 phase and cycle-specific. PCR-Select Subtraction: JVS Subtraction and mRNA Expression Difference between JVS Subtraction and JVS Subtraction (c57BL/6J) 1186clone Subtraction. The difference between the detection amount is very large,56clone detection is very large,BLAST detection is very large.その结果,23cloneが既知の遗伝子,15cloneが未知の遗伝子であった. The result of this study is that JVS has been found to be able to regulate the expression of ribosomal protein in the brain. "This is a good time,JVS, and the obstacles to fatty acid metabolism arise due to lack of kar This is a very interesting possibility for JVS to be able to increase its quality.