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ミトコンドリア増生の分子シンクロナイゼイションと新規蛋白質因子の解析

线粒体增殖的分子同步及新型蛋白质因子分析

基本信息

批准号：
13022248
负责人：
樋口富彦
金额：
$ 2.56万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

PCR-Select SubtractionによりJVSマウス及び対照マウス(c57BL/6J)の心臓間でmRNA発現量に差のある遺伝子を1186clone単離した.発現量の差が特に大きかった,56cloneについてシークエンスを行い,BLASTによりホモロジー検索を行った.その結果,23cloneが既知の遺伝子,15cloneが未知の遺伝子であった.今回のシークエンス結果から,JVSマウスの心臓においてup-regulateしている遺伝子にはribosomal proteinやストレス応答因子が多く含まれていることが分かった.このことから,JVSマウスでは,カルニチン欠乏により脂肪酸代謝障害が起きており,これが刺激(ストレス)となってこれらの遺伝子が増加したとも考えられる.これらはJVSマウスの心臓におけるミトコンドリアの増生(ミトコンドリアタンパク質の増加)にも関っている可能性があり,大変興味深い.JVSマウス心筋で対称マウスに比し差の見られた遺伝子(III,IV,V,VIII)及びp53(コントロール実験のための遺伝子)のシークエンスから21bpの配列を順配列→hairpin部分→逆配列からなるsiRNAを設計作製した.これらの二本鎖DNAをpSilencer 1.0-U6 siRNA Expression Vector(3292bp; Ambion,#7207)に組み込み,C2C12へトランスフェクションした.その結果,ミトコンドリアの凝集に関わるもの,核や細胞の大きさを顕著に増大させるものなど,興味深い実験結果が得られており,今後詳細に検討する必要がある.

PCR-Select Subtraction によりJVS マウス and び対肖マウス (c57BL/6J) の心臓间でmRNA発现quantity にdifferent のある remain伝子を1186clone単里した.発真人の differenceが特に大きかった,56cloneについてシークエンスを行い,BLAS Tによりホモロジー検SO を行った.そのRESULT, 23cloneがKnownの缝子,15cloneがUNKNOWNの缝子であった. This time's results are the same,JVSマウスの心臓においてup-regulateしている缝子にはribosomal protein やストレス応 Answer factor が多く contain まれていることが分かった.このことから, JVS マウスでは, カルニチン deficiency により fatty acid metabolism disorder がきており, これがStimulating(ストレス)となってこれらの伝子が姗加したとも考えられる.これらはJV Sマウスの心臓におけるミトコンドリアの嗗生(ミトコンドリアタンパク性の嗗加)にも关っているpossibilityがあり,大変interest深い.JVSマウス心丝で対说マウスに比しworseの见られた弝子(III,IV,V,VIII) and びp53(コントロール実験のための伝子)のシークエンスから21bpのalignmentをforward arrangement→hairpin part→reverse arrangement からなるsiRNAをdesign and productionした.これらの二本 lockDNAをpSilencer 1.0-U6 siRNA Expression Vector(3292bp; Ambion,#7207)に集团み込み,C2C12へトランスフェクションした.そのRESULT,ミトコンドリアのagglutinationに关わるもの,nuclear cell no big no. The results of the deep and deep research will be discussed in detail in the future.