神経成長円錐の糸状足形成機構に関する分子細胞生物学的研究

神经生长锥丝状伪足形成机制的分子细胞生物学研究

• 批准号: 03833002
• 负责人: 田代 朋子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03833002/
• 关键词: 成長円錐; アクチン; アクチン結合蛋白; 神経再生

神経の成長時及び再生時に神経突起の先端に形成される成長円錐は、活発な細胞運動能と高度の分子認識能により、神経経路形成に主要な役割を果たしている。成長円錐において特に運動能と認識能の高い糸状足部分ではアクチンがその構造及び運動の主体となることが形態学的に示されている。本研究では、このような糸状足の形成機構と制御機構を明らかにするために、単離成長円錐画分、in vivoの神経再生系、培養神経細胞の三つの実験系を用いて、アクチン調節蛋白の検索と細胞骨格蛋白の動態分析を行い、以下の結果を得た。1)ラット胎仔脳より成長円錐画分を単離し、ビオチン標識アクチンを用いたゲル・オ-バ-レイ法によりアクチン結合蛋白を検索したところ、成長円錐画分に局在する分子量44kD、pI5.9の蛋白を見出した。DNase Iカラムへの結合も認められるこの44kD蛋白は、胎齢18日の成長円錐に最も多く存在するが、発育に伴って減少し、成熟動物脳シナプトソ-ムには検出されないことから、成長円錐におけるアクチン機能にの調節に関連するものと期待される。2)ラット脊髄前角部に[ ^<35>S]メチオニンを注入することにより、坐骨神経運動繊維内を輸送される細胞骨格蛋白及び関連蛋白を標識し、DNase Iカラム、筋肉Fーアクチンとの共沈実験などにより分析した結果、アクチン結合蛋白として70kDのアネキシンVIと、45kD蛋白が検出された。また、神経再生時には、軸索内アクチン及びチュ-ブリンの溶解性が上昇することにより、その輸送速度が速くなることを見出した。3)ラット後根神経節細胞の初代培養系を用い、[ ^<35>S]メチオニンでパルス標識した細胞骨格蛋白の経時変化から、軸索に特徴的な安定重合型アクチン及びチュ-ブリンの形成過程を追跡した。

For a long time and at the time of regeneration, the protuberances of the gods form the growth cycle, the active cells are highly sensitive to the molecules, and the god path forms the main service to cut the fruit cycle. The growth and development of the special motor energy training and energy training system is related to the construction of the equipment and the demonstration of the morphology of the main body of the vehicle. In this study, the mechanism for the formation of skeletal bone lattice proteins was tested, and the following results were obtained through the dynamic analysis of bone lattice proteins. The results of the dynamic analysis of bone lattice proteins were satisfactory. The main results are as follows: 1) the growth of the baby, the growth of the baby, and the identification of the baby, the baby, the baby, The most common 44kD protein in the 18-day-old fetal growth cycle, the most common in DNase I, the most common in the 18-day-old, the most common in the 18-day-old fetal growth cycle, the most common in the 18-day-old fetal growth cycle, the most common in the fetal growth cycle. 2) double-click the front corner of the spine [^ & lt;35&gt S] the target protein was injected into the rabbit, the ischial god sent the cell bone protein and its protein tag, DNase I, muscle, muscle and muscle, the results of the analysis, the combination of the protein and the protein, the 70kD protein, the VI, and the protein were analyzed. During regeneration, the temperature in the cable, the temperature in the cable, and the solubility of the resin are affected, and the speed and speed of the transmission are very fast. 3) the primary culture of cell culture is based on the use of osteoblasts, [^ & lt;35>S] the labeling of osteoblast protein, the stable and coincident cell culture, and the formation of a process tracer.

项目成果

田代 朋子,小宮 義璋: "Changes in organization and axonal transport of cytoskeletal proteins during regeneration." Journal of Neurochemistry. 56. 1557-1563 (1991)

Tomoko Tashiro，Yoshiaki Komiya：“再生过程中细胞骨架蛋白的组织和轴突运输的变化。”《神经化学杂志》56。1557-1563（1991）

斎藤 繁,藤田 達士,小宮 義璋,五十嵐 道弘: "Biochemical Characterization of nerve growth cones isolated from both fetal and neonatal rat forebrains:the growth cone fraction mainly consists of axonal growth cones." Developmental Brain Research. (1992)

Shigeru Saito、Tatsushi Fujita、Yoshiaki Komiya、Michihiro Igarashi：“从胎儿和新生大鼠前脑中分离出的神经生长锥的生化特征：生长锥部分主要由轴突生长锥组成”（1992）。

関本 澄人,田代 朋子,小宮 義璋: "Two 68kDa proteins in slow axonal transport belong to the heat shock pr競tein family and the annexin family." Journal of Neurochemistry. 56. 1774-1782 (1991)

Sumito Sekimoto、Tomoko Tashiro、Yoshiaki Komiya：“慢轴突运输中的两种 68kDa 蛋白质属于热休克蛋白家族和膜联蛋白家族。” 神经化学杂志 56。1774-1782 (1991)

田代 朋子,小宮 義璋: "Maturation and aging of the axonal cytoskelton:biochemical analysis of transported tubulin." Journal of Neuroscience Research. 30. 192-200 (1991)

Tomoko Tashiro，Yoshiaki Komiya：“轴突细胞骨架的成熟和老化：转运微管蛋白的生化分析。” 神经科学研究杂志 30. 192-200 (1991)。

五十嵐 道弘,田代 朋子,小宮 義璋: "Actinーbinding proteins in growth cone particles(GCP) from fetal rat brain:A 44kDa actinーbinding protein is enriched in the fetal GCP fraction." Developmental Brain Research. (1992)

Michihiro Igarashi、Tomoko Tashiro、Yoshiaki Komiya：“胎儿大脑生长锥颗粒 (GCP) 中的肌动蛋白结合蛋白：胎儿 GCP 部分中富含 44kDa 肌动蛋白结合蛋白 (1992)。”