IL-2受容体新らたなサブユニットr鎖の機能解析

新IL-2受体亚基r链的功能分析

• 批准号: 04670283
• 负责人: 竹下 敏一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670283/
• 关键词: IL-2受容体; γサブユニット; 高親和性受容体; インターナリゼーション; チロシレキナーゼ

IL-2はT細胞を初め種々のリンパ球やマクロファージの増殖・分化因子であり、その作用は細胞表面のIL-2受容体に特異的に結合することにより発揮される。従って、IL-2作用機序を明らかにするには、IL-2受容体のサブユニット構造とそれらの機能を解析する必要がある。我々は、すでに、機能的なIL-2受容体には、従来から知られているα鎖・β鎖サブユニットに加え、第3のサブユニットγ鎖(p64)が付随していることを明らかにしてきた。本研究では、γ鎖の遺伝子を単離し、機能的IL-2受容体構築におけるγ鎖の役割を明らかにした。β鎖を導入したヒトT細胞株、MOLTβを用い、IL-2存在下でβ鎖と共沈してくるγ鎖を二次元電気泳動で精製し、γ鎖のアミノ酸配列の一部を決めた。それをもとにPCR法でプローブを作製し、γ鎖cDNAを単離した。塩基配列が推測されるγ鎖蛋白は、シグナルペプチドと膜貫通領域を1つづつもち、成熟分子は347このアミノ酸よりなる。γ鎖はアミノ末端に4個のCysを持ち、膜貫通部位に近いところにTrp-Ser-x-Trp-SerからなるWXモチーフをもつ典型的なサイトカイン受容体スーパーファミリーに属す分子である。γ鎖の発現は血球系細胞に限局しており、線維芽細胞には発現していない。γ鎖を含むIL-2受容体サブユニット分子を線維芽細胞に導入する実験から、高親和性受容体はα・β・γ鎖のヘテロ三量体からなり、中親和性受容体はβ・γ鎖のヘテロ二量体であることが明らかとなった。IL-2のインターナリゼーション、IL-2刺激によるチロシン・キナーゼの活性化、核内転写因子の転写促進は高親和性・中親和性受容体により伝達され、γ鎖はβ鎖とともに機能的なIL-2受容体に必須の分子であることを明らかにした。

IL-2 plays an important role in the development of T cell proliferation and differentiation factors, and specifically binds to IL-2 receptors on the cell surface. To clarify the mechanism of IL-2 action, it is necessary to analyze the structure and function of IL-2 receptor. The IL-2 receptor, which functions in the reverse direction, is known as the alpha lock, beta lock and gamma lock (p64). In this study, we investigated the structure of IL-2 receptor and its function.β-lock is introduced into T cell lines, MOLTβ is used, IL-2 is present, β-lock is co-precipitated, γ-lock is purified, γ-lock is partially resolved, and the acid sequence is determined. We also use PCR to produce ribosomes and isolate gamma-specific cDNA. The base sequence is presumed to be γ-locked protein, and the mature molecule is 347. The four Cys at the end of the gamma lock are held together, and the membrane penetration site is near the middle. Trp-Ser-x-Trp-Ser is a typical receptor. Gamma lock development is limited to the development of hematopoietic cells and linear germ cells. The γ-lock receptor contains IL-2, and the α-γ-lock receptor contains IL-2. The γ-lock receptor contains IL-2. IL-2 receptor activation, transcription of nuclear transcription factors, activation of IL-2 receptor activation, transcription of IL-2 receptor

项目成果

Takeshita,T.: "An associated molecule,p64,with IL-2receptor β chain:its possible involvement in formation of the functional IL-2 receptor complex." J.Immunol.148. 2154-2158 (1992)

Takeshita, T.：“具有 IL-2 受体 β 链的相关分子 p64：它可能参与功能性 IL-2 受体复合物的形成。J.Immunol.148 (1992)。

Kumaki,S.: "Cell type-specific activation of a tyrosine kinase associated with IL-2 receptor β chain in response to IL-2." FEBS letters. 310. 22-26 (1992)

Kumaki, S.：“与 IL-2 受体 β 链相关的酪氨酸激酶响应 IL-2 的细胞类型特异性激活。” 310. 22-26 (1992)。

Asao,H.: "IL-2-dependent in vivo and in vitro tyrosine phosphorylation of IL-2 receptor γ chain." FEBS letters. 304. 141-145 (1992)

Asao, H.：“IL-2 受体 γ 链的体内和体外酪氨酸磷酸化。FEBS 字母。”304. 141-145 (1992)

Takeshita,T.: "Cloning of the γ chain of the human IL-2 receptor." Science. 257. 379-382 (1992)

Takeshita, T.：“人类 IL-2 受体 γ 链的克隆。《科学》257. 379-382 (1992)。

Asao,H.: "Reconstitution of the junctional IL-2 receptor complexes on fibroblastoid cells:Involvement of the cytoplasmic domain of the γ chain in two distinct signaling pathways." Natl.Acad.Sci.USA.

Asao, H.：“成纤维细胞上连接性 IL-2 受体复合物的重建：γ 链胞质结构域参与两个不同的信号通路。”