IL-2受容体γ鎖の機能ならびに発現制御に関する研究

IL-2受体γ链功能及表达调控研究

基本信息

批准号：
05670292
负责人：
竹下敏一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670292/
关键词：
IL-2 IL-2受容体 γ鎖増殖シグナル単クロン抗体

项目摘要

我々はIL-2受容体の第3番目のサブユニット、γの遺伝子単離に成功し、IL-2受容体がα鎖、β鎖、γ鎖の3分子からなることをすでに証明している。本研究では、シグナル伝達におけるγ鎖の機能を解析した。また、近年γ鎖は、T細胞の欠失を特徴とする、X染色体に連鎖した重症複合免疫不全症(XSCID)の原因遺伝子であることが分ったが、IL-2遺伝子を破壊されたマウスのT細胞は正常に発生してくることから、γ鎖はIL-2以外のサイトカイン受容体であることが考えられる。我々は、γ鎖に対する単クロン抗体を作製して、γ鎖を共有する他のサイトカイン受容体を検索した。以上の成果を下記に記す。1)γ鎖の細胞内領域の部分欠失変異を作製し、IL-2受容体からのシグナル伝達には、チロシンキナーゼ活性化およびc-myc遺伝子誘導系とc-fos,c-jun遺伝子誘導系の少なくとも2つの経路があることを証明した。2)受容体のIL-2結合親和性は、IL-2の受容体への結合速度と解離速度によって決まるが、αβ鎖の組合わせにγ鎖が加わると、結合速度が4倍速くなり、解離速度は5倍遅くなることを見出した。3)IL-2受容体へのIL-2結合を阻害する、抗マウスγ鎖抗体(TUGm2)と結合を阻害しない抗マウスγ鎖抗体(TUGm3)を用いて、他のサイトカイン受容体へのγ鎖の関与を調べたところ、TUGm2はIL-4,IL-7受容体へのリガンド結合とIL-4,IL-7依存性増殖を阻害し、TUGm3はIL-4,IL-7結合γ鎖を免疫沈降したことから、γ鎖がIL-4およびIL-7受容体のサブユニットであることを明らかにした。4)マウスγ鎖遺伝子を単離し、IL-2受容体を再構築したところ、ヒトで中親和性IL-2結合能を持つβγ鎖の組合わせは、マウスでは、IL-2結合能を持たず、したがってマウスIL-2受容体で機能的な受容体はαβγ鎖からなる高親和性IL-2受容体のみであることを明らかにした。

我们已经成功地分离了IL-2受体γ的第三个亚基的基因，并且已经证明IL-2受体由三个分子组成：α，β和γ链。在这项研究中，分析了伽马链在信号传导中的功能。近年来，已经发现，伽马链是与X染色体相关的严重混合免疫缺陷（XSCID）的致病基因，其特征是T细胞缺失，但是由于来自IL-2基因的小鼠的T细胞正常发展，因此人们认为Gamma Chain是一种细链链是二氧化碳链以外的受体。我们生成了对伽马链的单克抗体，并搜索了共享伽马链的其他细胞因子受体。以上结果如下所述。 1）我们在伽马链的细胞内区域产生了部分缺失突变，表明至少有两种来自IL-2受体的信号传导：酪氨酸激酶激活和C-MYC基因诱导系统和C-FOS，C-FOS，C-JUN基因诱导系统。 2）受体的IL-2结合亲和力取决于IL-2与受体的结合和解离速率，但我们发现，当将伽马链添加到αβ链的组合中时，结合速率将变速4倍，而离解速率则慢5倍。 3）使用抗小鼠伽马链抗体（TUGM2）抑制IL-2结合与IL-2受体的结合和不抑制结合的抗小鼠伽马链抗体（TUGM3），我们研究了γ链在其他细胞因子受体中的参与。 TUGM2抑制了与IL-4和IL-7受体以及IL-4和IL-7依赖性增殖的配体结合，TUGM3免疫沉淀IL-4和IL-7结合γ链，表明Gamma链是IL-4和IL-4和IL-7受体的亚基。 4）当小鼠γ链基因分离并重建IL-2受体时，可以发现，人类中βγ链与中等亲和力IL-2结合能力的组合在小鼠中没有IL-2结合能力，因此在小鼠IL-2受体中唯一的受体功能是小鼠IL-2受体中的唯一受体功能是高生物学IL-2受体的高生物IL-2受体。