ヒト正常大腸粘膜DNAに結合していることがわかった2種の発癌物質の化学講造の同定

对两种与正常人结肠粘膜 DNA 结合的致癌物质进行化学鉴定

• 批准号: 04670783
• 负责人: 梅本 淳
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670783/
• 关键词: ^<32>P-ポストラベル法; 大腸癌; 発癌; 発癌物質; DNA付加体; 胆汁酸

大腸発癌において、食物中に存在する発癌物質や胆汁酸が重要な役割を果たしていると考えられている。そこで、総胆管ドレナージをおこなった胆石症患者から絶食期を経て次第に食事摂量が増加していく過程の胆汁を経日的に集めブルーレーヨンなどを用いて発癌物質の精製を行なった。これと2重鎖DNAを試験管内でインキュベートし、DNA付加体が生成されているかを^<32>P-ポストラベル法を用いて検討したところ、約3種類のDNA付加体が生成されることが解った。これら胆汁中に存在するDNAと結合し得る物質は食事摂取量が増加するにしたがって上昇する傾向が認められた。現在、化学構造分析に足りる充分な量のDNA付加体を得るための方法、例えば、肝臓のミクロゾームに含まれる代謝活性化酵素や各種の脱抱合酵素を使用する方法や、大量の胆汁から目的物質を精製する各種の方法を検討中である。一方、生体内に存在する4種類の胆汁酸と、その各々の抱合型胆汁酸、計12種類の合成胆汁酸を試験管内で反応され^<32>P-ポストラベル法で解析したところ、内4種類がDNAと結合能を有していることが判明した。従来、胆汁酸は発癌過程でプロモーターとして働くと考えられていたが、今回、胆汁酸がDNAと結合し発癌のイニシエーター(突然変異原)として働く可能性が示されたことは世界で初めてのことである。また、これらの付加体生成においては、反応液中の胆汁酸濃度が0.001mg/mlから1.0mg/mlという10^3倍の広範囲にわたり、直線的な用量相関がみられることがわかった。また4種類の胆汁酸の内のひとつから生成されるDNA付加体は、ヒト大腸や肝臓に存在する発癌物質-DNA付加体の一部と2次元薄層クロマトグラフィー上極めて類似しているため、その異同を現在確認中である。

The presence of carcinogenic substances and bile acids in large intestine cancer is an important factor in the development of cancer. In addition, the amount of cholelithiasis in patients with cholelithiasis increased during the fasting period, and the amount of cholelithiasis in patients with cholelithiasis increased during the fasting period. About <32>3 kinds of DNA adducts were produced in the 2-fold DNA assay tube by the P-DNA assay. The presence of DNA in bile increases the amount of food available. At present, methods for obtaining sufficient amounts of DNA adducts by chemical structure analysis, for example, methods for using metabolically active enzymes and various disconjugating enzymes in liver tissue, and methods for purifying large amounts of bile and target substances are discussed. Four kinds of bile acids, including syncytial bile acids and 12 kinds of synthetic bile acids, were found in one sample and in another sample<32>. In the future, bile acids may combine with DNA to develop cancer. In addition, due to the formation of these additives, the concentration of bile acids in the reflux solution ranges from 0.001mg/ml to 1.0mg/ml and is 10^3 times as wide, and there is a linear correlation between the amount of bile acids and the dosage. The presence of four kinds of bile acids in the body of the DNA donor is now confirmed as a carcinogen in the large intestine and liver.

项目成果

田中 正喜: "ヒト肝臓におけるステロイドホルモン結合DNAの存在" 消化器癌の発生の進展. 4. 379-380 (1992)

Masaki Tanaka：“人类肝脏中类固醇激素结合 DNA 的存在”胃肠癌的发展 4. 379-380 (1992)。

K.Kondo: "Mutations in the p53 tumor suppressor gene in primary lumy cancer in Japan" Biochem.Biophys.Res.Commun.183. 1139-1146 (1992)

K.Kondo：“日本原发性 lumy 癌中 p53 肿瘤抑制基因的突变”Biochem.Biophys.Res.Commun.183。

A.Umemots: "Detemination human exposure to the dietary couainoger 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4.3-b]indole(Trp-P-1)from hemoylobin adduct:The relationship to DNA adduct" Carcinogemesis. 13. 1025-1030 (1992)

A.Umemots：“测定人类从血红蛋白加合物中暴露于饮食中的辅酶 3-氨基-1,4-二甲基-5H-吡啶并[4.3-b]吲哚 (Trp-P-1)：与 DNA 加合物的关系”致癌作用。