アルファ2プラスミンインヒビター遺伝子のプロモーター領域に結合する蛋白質の同定

与α2纤溶酶抑制剂基因启动子区结合的蛋白质的鉴定

基本信息

  • 批准号:
    04671516
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1992
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1992 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

アルファ2プラスミン・インヒビター(α_2-plasmin inhibitor,α_2PI)遺伝子のプロモーター活性を有する領域に結合する蛋白質について研究することが今回の課題である。レポーターとしてCAT(chloramphenicol acetyl transferase)遺伝子を用いて、リン酸カルシウム法でHepG2細胞にトランスフェクトした。これまでの研究により、5'非翻訳領域をコードするエクソンが2種類存在することが明らかになった。これらのエクソンの上流にプロモーター部位が存在するかについて、5kbの領域について、いくつかの部分に分けてプロモーター活性の有無を検討した。その結果一番上流の、1.2kbのBamHIフラグメントに強いプロモーター活性がみられた。このフラグメントに関して、3'側より欠損ミュータントを作製して転写開始部位を限定することができた。次に5'側より欠損ミュータントを作製して活性を検討したところ、2つの正に働く領域と1つの負に働く領域を同定することができた。これらのフラグメントをCAT遺伝子の下流につないで検討したが、エンハンサーあるいはサイレンサーとしての活性は認められなかった。転写開始部位の上流のフラグメント(-37〜-67)とHepG2細胞の核蛋白質とを用いて、バンドシフトアッセイをおこなったところ、フリーのバンドの他に移動度の遅いバンドがみられた。このフラグメントの塩基配列についてみてみるとアルブミン遺伝子のDE1とC/EBPとの高いホモロジーがみられた。この部位に結合する蛋白質がα_2PI遺伝子の発現制御に重要と考えられる。
The research of protein binding in the field of protein binding activity of α_2-plasmin inhibitor (α_2PI) gene is a current topic. HepG2 cells were identified by CAT(chloramphenicol acetyl transferase) gene transfer method. This research area, 5'non-inverted domain, has two kinds of existence. The presence or absence of this activity in the upper part of the system is examined in the 5kb domain. As a result, a 1.2 kb BamHI file was created. This is the first time that a person has ever been involved in a crime, and the third time that a person has ever been involved in a crime. The second 5'side of the loss is controlled by the active field, the second positive field and the third negative field. This is the first time I've ever seen a CAT in my life. The up-stream protein of HepG2 cells (-37 ~-67) and the nuclear protein of HepG2 cells were used in the study. This is the first time that the company has been involved in the development of a new technology. The protein binding to these sites is an important factor in the development of α_2PI proteins.

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Koh Yamamoto: "Frequent rearrangements of retinoic acid receptor alpha gene and Myl gene,and rare mutations of ras and fms genes in acute promyeloeytic leukemia" Am J Hematol. 40. 252-258 (1992)
Koh Yamamoto:“急性早幼粒细胞白血病中视黄酸受体 α 基因和 Myl 基因的频繁重排以及 ras 和 fms 基因的罕见突变”Am J Hematol。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Shinsaka Hirosawa: "Molecular approaches to the study and treatmeut of human diseases-molecular characterization of hemophilia B Leyden:an abnormal develoomental gene rezulation" Elsevier Science Publishens, (1992)
Shinsaka Hirosawa:“研究和治疗人类疾病的分子方法 - 血友病 B Leyden 的分子特征:异常的发育基因调节”Elsevier Science Publishens,(1992)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
広沢 信作: "α_2ープラスミンインヒビターー遺伝子とその異常" 医学のあゆみ. 160. 669-672 (1992)
Shinsaku Hirosawa:“α_2-纤溶酶抑制剂基因及其异常”医学史160。669-672(1992)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Ryushi Tazawa: "Functional characterization of the 5'-regulatory region of the human thrombomodulin gene" J.Biochem. (1993)
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yuichi Nakamura: "Consistent involvement of the 3'half part of the first BCR intron in adult philadelphia-positive leukemia without M-bcr rearrangement" Brit J.Haematol.83. 53-57 (1993)
Yuichi Nakamura:“第一个 BCR 内含子的 3 半部分在成人费城阳性白血病中持续参与,没有 M-bcr 重排”Brit J.Haematol.83。
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  • 发表时间:
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