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海産養殖魚のビルナウィルス感染症に対する組換えコンポーネントワクチンの創製

研制针对海水养殖鱼类双RNA病毒感染的重组疫苗

基本信息

批准号：
05806026
负责人：
鈴木聡
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

遺伝子組換え技術を用い、海産魚のビルナウィルス感染症に対するコンポーネントワクチンを創製することを目的とした基礎的研究を行い、次のような知見を得た。まず、ウィルスのcDNAクローニングを行った。精製したウィルス粒子をプロナーゼKで消化してウィルスゲノムRNAを得た。これを逆転写によって一本鎖cDNAにし、さらにセルファニールしギャップを修復して二本鎖cDNAとした。さらに、プラスミドpUC18のPstIサイトに組み込んでライブラリーを作成した。このcDNAライブラリーを大腸菌JM107にトランスフェクトした。得られたクローンのうち、pY6-1(950bp)、pY6-2(681bp)およびpY6-3(545bp)の全塩基配列を決定した。これらのうち、pY6-2はIPNVのJasper株、N1株のカプシドタンパク質VP2遺伝子とホモロジーがあった。VP2はウィルスの抗原性決定に重要なタンパク質なので、本研究で得られたクローンはコンポーネントワクチンをデザインする上で有用な情報を提供すると考えられる。今後は、さらに抗原決定基を特定し、その部位の遺伝子を用いてコンポーネントワクチンの開発を進める予定である。また、海産魚から分離されたビルナウィルスのカプシドタンパク質を免疫学的手法で解析したところ、供試6株で高いホモロジーが認められた。このことは、種々の海産養殖魚のビルナウィルス症はきわめて類似した抗原を持つウィルスによって起こっていることを示唆している。したがって、本研究をもとに開発されるビルナウィルスワクチンは多くの魚種に適応可能であると考えられ、海産魚の養殖に大いに貢献することが期待される。本研究の一部は日本魚病学会、およびJ.Fish Dis.に発表された。

Infectious Diseases of Marine Fish Infectious Diseases The purpose of the creation of すクチンをすることを is the basic research of としたを行い, and the time is のような知见を得た.まず、ウィルスのcDNAクローニングを行った. Refined したウィルス particle をプロナーゼKで digestion してウィルスゲノムRNAをgetた. The reverse writing of によってone lock cDNAにし, and the さらにセルファニールしギャップをrepair してtwo locks cDNA とした.さらに、プラスミドpUC18のPstIサイトに组み込んでライブラリーを成した.このcDNAライブラリーを coli JM107にトランスフェクトした. The whole base arrangement of pY6-1 (950bp), pY6-2 (681bp) and pY6-3 (545bp) was determined.これらのうち, pY6-2 IPNVのJasper strain, N1 strain のカプシドタンパクquality VP2 legacy とホモロジーがあった. VP2's antigenicity determines its important antigenicity, and the results of this study were determinedンはコポーネントワクチンをデザインする上で Useful information is provided by すると考えられる. From now on, the use of specific epitopes and parts of the epitope will be determined by the use of いてコンポーネントワクチンの开発を入める. Separate seafood fish The method of epidemiology is to analyze the disease and test 6 strains of high-toxicity disease. Similar to このことは、kind of 々のMarine cultured fish のビルナウィルス性はきわめてしたantigenをholdつウィルスによって出こっていることをshows instigationしている. This study is about It is possible to adapt to the situation, and it is a great contribution to the cultivation of marine fish. It is expected to be done. Part 1 of this study was published by the Japanese Fish Disease Society, J. Fish Dis.