組み換えアストロサイト移入によるSCID-hu-MSの脱髄機構の解明

通过重组星形胶质细胞移植阐明 SCID-hu-MS 脱髓鞘机制

• 批准号: 06670653
• 负责人: 佐古田 三郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670653/
• 关键词: サイトカイン; 脱髄; アストロサイト; IL-2; interferon-γ; 免疫不全マウス

severe combined immunodeficiency(SCID)miceは成熟したTおよびB細胞がなく中枢神経系でのサイトカインネットワークを研究するためには良いシステムである.私どもはサイトカインのみで中枢神経系の脱髄が生じうるという仮説のもとに本研究を行った.SCIDマウスよりアストロサイトを分離しそれにIL-1β,IL-6,TNF-α,IL-2のcDNAを導入しneomysin抵抗性の株を選択した.それぞれのサイトカインの発現はRT/PCRにて確認し,蛋白レベルの発現はELIZAと感受性細胞のバイオアッセ-を行った.それらの細胞を単独および種々の組み合わせでSCIDマウスの脳内に移入し,2週間後にマウスを屠殺し神経病理学的に検討した.その他ヒトIL-2とマウスinterferon-γ(INF-γ)のリコンビナントを脳内に注射し,同様の実験を行った.コントロールにはそれぞれのリコンビナントを加熱により不活化したものを用いた.単独で上記アストロサイトのトランスフェクタントを移入した場合,IL-2のトランスフェクタントでのみ壊死と脱髄が高頻度に観察された.これら病変は細胞移入部からかなり離れた白質にもみられた.その他のサイトカイントランスフェクタント単独および組み合わせでは刺入部の変化以外は病変を認めなかった.IL-2のリコンビナントをSCIDマウスの白質に注射した場合もIL-2トランスフェクタントの場合と同様の結果を得た.INF-γのリコンビナントの場合は白質に限局したvacuolation(脱髄)が高頻度に観察された.IL-2やINF-γはSCIDマウスのNK細胞を活性化する.活性化されたNK細胞は再びINF-γを放出しグリア細胞からTNF-αやinducible NO synthase(iNOS)を誘導しオリゴデンドロサイトに障害を与えると考えられる.

severe combined immunodeficiency(SCID)mice mature T and B cells and are studied in the central nervous system. The cDNA of IL-1β,IL-6,TNF-α and IL-2 were introduced into the cells of the central nervous system. RT/PCR was used to confirm the expression of protein in the cells. ELIZA was used to detect the expression of protein in the cells. The cells were isolated and the cells were transplanted into the SCID. After 2 weeks, the cells were killed and the neuropathology was investigated. IL-2 and INF-γ are injected into the system. The heat of the furnace is not enough to activate the furnace. In addition,IL-2 has been detected frequently in the presence of a high frequency of virus infection. The disease is caused by cell migration. IL-2 is a highly effective and efficient method for detecting the presence and absence of a virus in a human body.IL-2 is a highly effective method for detecting the presence and absence of a virus in a human body. γ-SCID and NK cell activation Activated NK cells release TNF-γ and inducible NO synthase(iNOS).

项目成果

Shimizu Y.et al.: "Isolation of a cDNA clone encoding a novel membrane protein expressed in lymphocytes." FEBS Letters. 355. 30-34 (1994)

Shimizu Y.等人：“分离编码淋巴细胞中表达的新型膜蛋白的 cDNA 克隆。”

Mitsui T.et al.: "Hereditary parkinsonism with multiple system degeneration: beneficial effect of anticholinergics.but not of levodopa." Jounal of Neurological Science. 125. 153-157 (1994)

Mitsui T.et al.：“遗传性帕金森病伴多系统退化：抗胆碱能药物有益，但左旋多巴无效。”

Yoshikawa H.et al.: "An elevated expression of mRNA for peripheral myelin protein-22 in biopsied nerves of patients with Charcot-Marie-Tooth disease type 1A." Annals of Neurology. 35. 445-450 (1994)

Yoshikawa H.等人：“1A 型腓骨肌萎缩症患者的神经活检中外周髓磷脂蛋白 22 的 mRNA 表达升高。”

Yamamoto Y.et al.: "Cloning and expression of myelin-associated oligodendrocytic basic protein(MOBP): A novel basic protein constituting the CNS myelin." Jounal of Biological Chemistry. 269. 31725-31730 (1994)

Yamamoto Y.等人：“髓磷脂相关少突胶质细胞碱性蛋白（MOBP）的克隆和表达：一种构成中枢神经系统髓磷脂的新型碱性蛋白。”