哺乳動物のDnaJホモローグのクローニングと生理機能の解明

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ストレス応答時に発現するストレス蛋白質は非ストレス時においても、種々の蛋白質の細胞内輸送における分子シャペロンとして重要な機能を果たしていると考えられている。研究代表者らはhsp70ファミリー蛋白質がカルモジュリン結合能を持つ性質を利用して、カルモデュリン結合分画に対する抗体を用いて酵母発現ライブラリーをスクリーニングした。単離された数個のクローンの遺伝子配列を決定し、全アミノ酸配列を予測した。このうちの一つがhsp70ファミリー蛋白質と結合すると思われるJ領域および、ホモダイマーまたはヘテロダイマーを形成すると思われるロイシンジッパー構造を持つ事が明らかになり、新しいDnaJ蛋白質遺伝子であったのでCAJ1と命名した。CAJ1はJ領域において、研究代表者らが既に単離したhsp70ファミリー蛋白質であるSSE1と結合すると考えられる。最近、他の研究グループによりCAJ1と同一の遺伝子が単離され、発芽酵母の接合フェロモン受容体のシグナル伝達に関与していることが明らかにされた。また、CAJ1のJ領域にあたるN-未満、約70アミノ酸残基をコードするcDNA断片を発現ベクターに組み込み、グルタチオン-S-トランスフェラーゼとの融合蛋白質として大腸菌内で大量発現させた。これを抗原として、抗体作製に成功した。