閉鎖系細胞培養システムを活用した癌免疫治療細胞への効果的な遺伝子導入法の開発

使用封闭细胞培养系统开发有效的基因转移方法到癌症免疫治疗细胞中

• 批准号: 21890059
• 负责人: 片野 尚子
• 金额: $ 1.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890059/
• 关键词: トランスレーショナルリサーチ; ウイルスベクター; 遺伝子治療; 細胞療法; 樹状細胞; 免疫学

癌免疫治療においては患者由来の血液細胞にウイルスベクターを介しex vivoで治療遺伝子を導入し、生体内で抗腫瘍免疫反応を誘導する治療法が有望であるが、その細胞調製は複雑であり、高品質な細胞を安定して供給できるシステムづくりが臨床試験研究の推進に不可欠となっている。そこで、本研究では、安全性が高く、効果的な遺伝子導入手法を開発する目的で、フッ素樹脂製ガス透過性バッグを用いた閉鎖系細胞調製システムを構築し、さらにこれに遠心力を併用した遺伝子導入工程にも拡大することを試みた。平成21年度は、各工程における閉鎖系細胞調製システム化の検討を行った。遺伝子導入工程については、遠心力を併用する手法を開発するため、培養バッグに対応した遠心機バケット用のラックの設計を開始した。遺伝子導入を除く、細胞分離-培養-細胞回収-凍結保存の4工程については、これらを完全閉鎖系とするため、これまでに部分的な閉鎖系培養システムが導入されている樹状細胞を用いた癌ペプチドワクチン療法の臨床研究をモデルとして、その規模を1/20とした系を作成した。この系において、ヒト末梢血単核球から分離した単球をGM-CSF,IL-4存在下で培養して未成熟樹状細胞を調製し、細胞数・生存率測定、および、細胞表面抗原発現解析を行い、遺伝子導入前の細胞特性に関する情報を得た。現在、これらの評価項目をもとに遺伝子導入手法の最適化を行っているところである。

In cancer immunotherapy, the introduction of therapeutic genes into patient-derived blood cells and induction of anti-tumor immune responses in vivo are expected to promote clinical trial research and stable supply of high-quality cells. The aim of this study is to develop a new method of gene introduction with high safety and efficiency, and to construct a new method of gene introduction with high safety and efficiency. In 2011, the research on cell modulation of various projects was carried out. The introduction of gene into the project is the beginning of the design of the development of the method of combining the medium and the remote force. The four projects of gene introduction, cell separation-culture-cell recovery and freezing preservation were carried out in a complete closed system and a partial closed system culture system was carried out in a clinical study of dendritic cells used in cancer treatment. The system was developed by culturing immature dendritic cells in the presence of GM-CSF,IL-4, and isolating peripheral blood mononuclear cells. Cell number, survival rate, and cell surface antigen expression were analyzed. Information on cell characteristics prior to gene introduction was obtained. Now, the evaluation of the project, the optimization of the introduction method, the implementation of the project.