Induced pluripotent stem cell-derived dendritic cell vaccine therapy genetically modified on the ubiquitin-proteasome system

对泛素-蛋白酶体系统进行基因改造的诱导多能干细胞衍生的树突状细胞疫苗疗法

• 批准号: 22K20834
• 负责人: 冨永 信太
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20834/
• 关键词: がん免疫療法; 樹状細胞ワクチン; iPS細胞; ユビキチンプロテアソーム系

より免疫原性の高いTAAとしてMesothelin (MSLN)をターゲットとした．また，iPSDCsの抗原提示能を増強する工夫として，ユビキチンプロテアソーム系による抗原プロセッシングに着目した．その結果，(1) 3名の健常人ドナーからMSLN遺伝子導入iPSDCs (iPSDCs-MSLN)を作成し，いずれのドナーにおいてもiPSDCs-MSLNにより誘導したCTLsは，MSLN発現ターゲット細胞に対する細胞傷害活性を示したことを証明した．また，ユビキチンとMSLNの融合遺伝子をiPSDCsに導入する効果として，(2)-1 iPSDCs内のMSLNタンパク発現を免疫染色とFACSで評価することで，Ub-MSLN融合遺伝子導入iPSDCs (iPSDCs-UbMSLN)ではiPSDCs-MSLNと比較してiPSDCs内でのMSLNの蛋白分解が亢進しており，その蛋白分解はプロテアソームに依存することが示された．また，(2)-2 Pentamer assayにより，iPSDCs内のMSLN蛋白分解の亢進は，iPSDCs-UbMSLNにおけるMSLN由来エピトープペプチドの抗原提示能を高め，iPSDCs-MSLNと比べてMSLN特異的CTLsをより多く誘導することを示した．さらに，(2)-3 iPSDCs-UbMSLNはiPSDCs-MSLNと比べて細胞傷害活性も高める可能性が51Cr-release assayにより示唆された．これらの結果から，ユビキチンとMSLNを同時に発現する遺伝子改変iPSDCsワクチンは，より多くのMSLN特異的CTLsを誘導し，より強力な細胞傷害活性をもたらすことを示した．

High immunogenicity of TAA and Mesothelin (MSLN). In addition, iPSDCs have increased their ability to detect antigens. The results are as follows: (1) Three healthy individuals were introduced into iPSDCs (iPSDCs-MSLN) to construct the IPSDCs-MSLN-induced CTLs, and MSLN-induced cellular injury activity was demonstrated. In addition, Ub-MSLN fusion gene introduced into iPSDCs (iPSDCs-UbMSLN) can enhance the proteolysis of MSLN in iPSDCs, and the proteolysis of MSLN in iPSDCs is dependent on the proteolysis of MSLN. In addition,(2)-2 Pentamer assay indicates that MSLN proteolysis in iPSDCs is enhanced, and iPSDCs-UbMSLN has a higher ability to induce MSLN than MSLN-specific CTLs. Today,(2)-3 iPSDCs-UbMSLN is more likely than iPSDCs-MSLN to cause cell injury. The results showed that the MSLN activity was significantly higher than that of the control group.

项目成果

Induced pluripotent stem cell-derived dendritic cell vaccine therapy genetically modified on the ubiquitin-proteasome system

• DOI: 10.1038/s41434-023-00388-z
• 发表时间: 2023-03-23
• 期刊: GENE THERAPY
• 影响因子: 5.1
• 作者: Tominaga，Shinta;Ojima，Toshiyasu;Yamaue，Hiroki
• 通讯作者: Yamaue，Hiroki