课题基金 / 基金详情

細胞質持続発現型RNAベクターを用いた高効率かつ安全な分化誘導方法の確立

細胞質持続発現型RNAベクターを用いた高効率かつ安全な分化誘導方法の確立
建立高效、安全的细胞质持续表达RNA载体分化诱导方法
批准号：
23890026
负责人：
西村 健
金额：
$2.08万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2011
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2011-08-24 至 2013-03-31
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23890026/
关键词：
持続発現型ベクター神経分化未分化細胞除去

项目摘要

项目成果

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マウスiPS細胞から神経細胞を分化させる系において、残存未分化細胞を除去するために、細胞質持続発現型RNAベクターを用いる系の構築を行った。まず、ブラストサイジン耐性遺伝子とP450遺伝子を同時に発現する細胞質持続発現型RNAベクターを用意し、それをマウスiPS細胞に感染させた。ベクター感染細胞を選択するためにブラストサイジンを培地に加えてpositive選択を行ったところ、ベクター非感染細胞の除去に成功した。また、ベクター感染によるマウスiPS細胞の生育阻害等は観察されなかった。このようにして用意した、すべての細胞にベクターが感染している細胞群に対して、次に、P450遺伝子の基質であるcyclophosphamideを培地に加え、negative選択の可否を検討した。その結果、数日ですべての細胞が死滅したことから、1つの細胞質持続発現型RNAベクターを用いて、positive-negative選択が可能であることを明らかにした。また、マウスiPS細胞を神経分化させる系の立ち上げも並行して行った。マウスiPS細胞から胚葉体を形成させ、ゼラチンコート上でレチノイン酸によって神経細胞への分化を誘導した。その結果、胚葉体形成から約2週間ほどすると、神経細胞様の細胞が観察されるようになったことから、このような系を用いて、マウスiPS細胞から神経細胞の誘導を行うことが出来ることを明らかにした。現在、上記のpositive-negative選択細胞質持続発現型RNAベクターを感染させたマウスiPS細胞を神経細胞に分化させた時の、分化能への影響、感染持続性への影響、未分化細胞除去の可否、等を検討している。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
RNA工学とウイルス学の融合による簡便かつ高効率なiPS細胞樹立方法の確立
结合RNA工程和病毒学建立简单高效的iPS细胞构建方法
DOI： --
发表时间： 2011
期刊：
影响因子： --
作者： [Arakaki M, Nakamura T, Fukumoto S, et.al, 西村健]
通讯作者： 西村健
転写因子の量依存的な細胞運命決定機構の解明
  • 批准号：
    23K27100
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $7.82万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    西村 健
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
Cell fate decision by dose of transcription factors
  • 批准号：
    23H02407
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $12.06万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    西村 健
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
Mechanism Design by an Informed Principal: An Application to the Problems of Aftermarkets
  • 批准号：
    23K01315
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $3.0万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    西村 健
  • 依托单位：
    Komazawa University
Ultra-weak photon emission due to fungal wood decay by brown rot fungi and the possible application aiming for wood preservation
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