脳の老人性変化の生化学的性状と形成機序に関する研究

脑衰老变化的生化特性及形成机制研究

• 批准号: 61570524
• 负责人: 西村 健
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570524/
• 关键词: アルツハイマー型老年痴呆; 神経原線維変化; cathepsin D; 脳虚血; 砂ネズミ; microtubule associated protein2(MAP2)

1.アルツハイマー型老年痴呆患者の脳内に異常に増生する神経原線維変化(NFC)の発生機序を知る目的で、ライソゾーム内酵素のひとつであるcathepsin Dについて検討した。(1)NFCの構成要素の1つとしてneurofilament(nf)蛋白質が考えられているが、その構成蛋白質である200K,160K,68K,いずれもcathepsin Dによって分解された。陰性染色による電顕観察によっても再構成されたnf線維がcathepsin Dによって分解されるのが観察された。(2)各構成蛋白質の分解産物中に分子量(m.w.)50000の位置に相当する蛋白質サブユニットが含まれていた。NFCの構成蛋白質の1つがnf粗分画中のm.w.50000の蛋白質の抗体と反応することがわれわれのこれまでの成績から知られており、今回の成績から、NFCの形成にcathepsin Dなどのライソゾーム内酵素が関与している可能性が示唆された。2.痴呆の発症と脳血流の関連性をみる目的で、砂ネズミを用いて脳虚血モデルを作製し、その脳内の蛋白質の変化を検討した。(1)両側総頚動脈をクリップで閉塞することによって脳虚血を作製し、再開通後、脳蛋白質の変化をポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)により検討した。脳水溶性画分中のm.w.25500(band1),24000(band2),18000(band3)の各蛋白質が減少を示した。水不溶性画分に異常は認められなかった。(2)immunoblotting法によって、band1蛋白質はmicrotubule associated protein2(MAP2)、band2はカルスペクチン、band3はクラスリンであることが同定された。(3)MAP2は血流再開通直後より著明に減少し、変化を示した3つの蛋白質の中でも、最も脳虚血状態に影響を受けやすい蛋白質であった。(4)蛋白質減少の機序を検討する目的で、脳水溶性分画にCa【Cl_2】を添加しincubateした後PAGEで分析した結果、MAP2は【Ca^(++)】濃度に依存して減少し、leupeptinによってその減少が抑制された。このことから、虚血脳におけるMAP2の変化には【Ca^(++)】依存性蛋白質分解酵素が関与している可能性が示唆された。

1. The abnormal development of neurogenesis in Alzheimer's patients with Alzheimer's disease (Alzheimer's disease) is discussed in order to understand the development process of neurogenesis (NFC). (1) NFC constituent elements and 1 neurofilament (nf) protein The negative staining pattern is composed of nf lines and cathepins. (2)Molecular weight (m.w.) of decomposition products of each constituent protein The 50000 position corresponds to the protein content. The protein of NFC is composed of m.w.50000 protein, and the antibody and anti-antibody of NFC protein are related to the possibility of NFC formation. 2. To investigate the relationship between dementia and blood flow, to investigate the role of blood flow in the development of dementia, and to investigate the protein transformation in dementia. (1)The protein transformation in the blood was investigated by PAGE after the blood was re-opened. The decrease of m.w. 25500 (band 1), 24000 (band 2) and 18000 (band 3) proteins in the water-soluble fraction was shown. Water insoluble paint is abnormal. (2) Immunoblotting method: band1 protein is microtubule associated protein2 (MAP2), band2 protein is microtubule associated protein2 (MAP2), band3 protein is microtubule associated protein2 (MAP2). (3) MAP 2 is the protein that is affected by the blood flow reopening and the protein that is affected by the blood flow reopening. (4)The mechanism of protein decrease was discussed. The results of PAGE analysis after Ca [Cl_2] addition and incubation were analyzed. The decrease of MAP [Ca ^(++)] concentration was dependent on the decrease of leptin. The possibility of the transformation of MAP 2 into Ca ^(++)-dependent proteolytic enzymes is shown.

项目成果

西村健,山下正,多田國利,武田雅俊,播口之朗,祖父江憲治: 神経研究の進歩. 30. 1101-1110 (1986)

Ken Nishimura、Tadashi Yamashita、Kunitoshi Tada、Masatoshi Takeda、Yukio Hariguchi、Kenji Sobue：神经学研究进展。30。1101-1110（1986）。

鈴木英夫,武田雅俊,加藤佳也,山下正,多田國利,播口之朗,西村健: 神経化学. 25. 172-174 (1986)

Hideo Suzuki、Masatoshi Takeda、Yoshiya Kato、Tadashi Yamashita、Kunitoshi Tada、Y. Hariguchi、K. Nishimura：神经化学。 25. 172-174 (1986)

西村健,山下正,多田国利,Ramon Cacabelos,新川久義,鈴木英夫: 脳と神経. 39. 9-16 (1987)

Ken Nishimura、Tadashi Yamashita、Kuniyoshi Tada、Ramon Cacabelos、Hisayoshi Shinkawa、Hideo Suzuki：大脑和神经。 39. 9-16 (1987)