B型肝炎ウイルスの生活環に必要な小胞輸送の分子スイッチの解明

阐明乙型肝炎病毒生命周期所需的囊泡运输分子开关

• 批准号: 26893011
• 负责人: 井上 淳
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26893011/
• 关键词: HBV; Rab

B型肝炎ウイルス（HBV）感染は肝硬変や肝癌の原因となり、世界的な問題の一つである。HBVは感染肝細胞において宿主細胞の機能を利用して自身の複製を行っているが、未だその詳細については不明な点が多い。特に、ウイルスが細胞内に侵入した後にどのように輸送されるか、あるいはウイルス複製過程においてその構成タンパクやゲノムがどのように輸送され、組み立てられて細胞外に放出されるかについてはほとんど明らかにされていない。本研究では細胞内輸送に必要な機構がどのようにHBVに利用されているか、小胞輸送の分子スイッチと考えられている低分子量GTPaseのRabタンパク質ファミリーに注目して明らかにすることを目的とした。まず、HBV粒子を恒常的に発現しているが放出されたHBVは再感染しないHepG2.2.15細胞を用いて、HBVの放出に関与するRabタンパク質を同定することとした。61種類のRabタンパク質ファミリーに対するsiRNAライブラリーを用いて、各Rabタンパク質を個別にノックダウンし、培養上清中に放出されたHBV DNAをreal-time PCRで、HBsAgをCLIA法にて定量した。その結果、Rabタンパク質によってHBV DNAを主に変化させるもの、HBs抗原を主に変化させるもの、両者を変化させるものに分けられた。HBV DNAは主にHBV粒子を、HBs抗原はゲノムやコアを含まないHBs抗原粒子 (SVP, subviral particle) の量を反映していると考えられており、HBV粒子とHBs抗原粒子を放出させる経路が異なっていることを示していると思われた。

Hepatitis B ウ ウ ス ス (HBV) infection ウ liver cirrhosis や causes of liver cancer とな <s:1> the world 's な problems ウ である である. は HBV infected hepatocytes に お い て function of host cell の を using し の copy line を っ て itself て い る が, not だ そ の detailed に つ い て は unknown な が い more. に, ウ イ ル ス に が cell invasion し た after に ど の よ う に conveying さ れ る か, あ る い は ウ イ ル ス replication process に お い て そ の constitute タ ン パ ク や ゲ ノ ム が ど の よ う に conveying さ れ, group み て ら れ て extracellular に release さ れ る か に つ い て は ほ と ん ど Ming ら か に さ れ て い な い. This study で は intracellular delivery に な necessary institutions が ど の よ う に HBV に using さ れ て い る か, vesicular transport の molecular ス イ ッ チ と exam え ら れ て い る low molecular weight GTPase の Rab タ ン パ ク qualitative フ ァ ミ リ ー に attention し て Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. ま ず, HBV particle を constant に 発 now し て い る が release さ れ た は HBV reinfection し な い HepG2.2.15 cells を using い て, HBV の release に masato and す る Rab タ ン パ ク qualitative を be す る こ と と し た. 61 species の Rab タ ン パ ク qualitative フ ァ ミ リ ー に す seaborne る siRNA ラ イ ブ ラ リ ー を with い て and Rab タ ン パ ク qualitative を individual に ノ ッ ク ダ ウ ン し, culture supernatant に discharges the さ れ た HBV DNA を real - time PCR で, HBsAg を CLIA method に て quantitative し た. そ の results, Rab タ ン パ ク qualitative に よ っ て HBV DNA を main に variations change さ せ る も の, HBs antigen を に variations change さ せ る も の, struck を variations change さ せ る も の に points け ら れ た. HBV DNA に main にHBV particle を, HBs antigen ゲノムやコアを ゲノムやコアを containing まな HBs antigen particle (SVP) Subviral particle) の を reflect し て い る と exam え ら れ て お り, HBV particle と HBs antigen particles を emit さ せ る 経 road が different な っ て い る こ と を shown し て い る と think わ れ た.

项目成果

B型肝炎ウイルスによる小胞輸送システムの変化と治療応用の可能性

乙型肝炎病毒引起的囊泡运输系统的变化及其潜在的治疗应用

• 发表时间: 2015
• 作者: 井上 淳;近藤 泰輝;下瀬川 徹
• 通讯作者: 下瀬川 徹

仙台市におけるB型急性肝炎のgenotypeの推移およびgenotype毎の特徴の解析

仙台市急性乙型肝炎各基因型基因型趋势及特征分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 井上 淳;近藤 泰輝;下瀬川 徹
• 通讯作者: 下瀬川 徹

Hepatitis B virus enhances the endo-lysosomal pathway through the activation of the small GTPase Rab7 via an interaction between HBe and the Rab7 GAP, TBC1D15

乙型肝炎病毒通过 HBe 和 Rab7 GAP、TBC1D15 之间的相互作用激活小 GTPase Rab7，从而增强内溶酶体途径

• 发表时间: 2014
• 作者: Jun Inoue;Eugene W. Krueger;Jing Chen;Hong Cao;Tooru Shimosegawa;Mark A. McNiven
• 通讯作者: Mark A. McNiven