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組換え機構の分子的基礎

重组机制的分子基础

基本信息

批准号：
03267102
负责人：
堀田康雄
金额：
$ 42.62万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

減数分裂時における遺伝子組換え頻度は体細胞で起こるものの100〜1,000倍に上昇するが、そのような上昇を示さない酵母の突然変異株をその原因となる機構の面より分類し遺伝子を確認した。グル-プ1:体細胞の組換えとDNA修復に関与するもの(RAD52)、グル-プ2:同時にDNA障害修復欠損をもつもの(RAD50,MRE11)、グル-プ3:減数分裂期組換えにのみ欠損をもつもの(SPO11,HOP1,MRE2〜4)。二重変異株解析からグル-プ3→グル-プ2→グル-プ1の順に上位にあること、MRE11はRAD50の上位にあることを決めた(小川)。窒素飢餓減数分裂誘導時の特異的cDNAのクロ-ン化と分類を行いその全塩基配列を決定し(全7種)SPO^ー遺伝子とproteinase βを発見した。他の5種は新しいものであった。組換えに於てDNAの相同的対合を行うrecA蛋白の反応測定系を確立し、一本鎖DNA結合蛋白(SSB)の効果も明らかにした。多部位切断型塩基配列特異的エンドヌクレア-ゼ“Eendo SceI"がミトコンドリアで組換え開始に働くことを示した(柴田)。IS1とTn3トランスポゼ-スの解析からN末とC末がDNA転移反応に関与する機構が明らかになった(大坪)。組換えのホットスポットについて、雄減数分裂に特異的組換え抑制因子がtransの位置でも効果を示し、抑制因子が遺伝子産物として作用していることを示唆した。転写産物は精巣細胞でセントロメアからテロメアの方向に進むことをPCRにより決定した(城石)。相同組換えの機構について、「複製によって作られる二重鎖切断あるいはそれと等価な構造が非保存的組換えを促進する」ことを示し真核生物で導入遺伝子と内在遺伝子間相同組換えを解析した(小林)。真核生物の減数分裂における組換え遺伝子の種類とその実体が明らかにされ、相同染色体上のホットスポットの解析から促進因子と抑制因子の動態、それに関する実験仮説の提出があり、組換えの分子レベルでの解析が進んだ。

During meiosis, the frequency of gene mutation increased by 100 ~ 1,000 times from somatic cell initiation to somatic cell initiation, indicating the cause of sudden mutant mutation in yeast. The first step is DNA repair (RAD52), the second step is DNA damage repair (RAD 50,MRE11), and the third step is meiotic DNA repair (SPO11,HOP1,MRE2 ~ 4). The analysis of double heterosis plants is from 3 to 2, and MRE11 to RAD50. The expression of SPO gene protein β was detected in the 7 species of SPO gene. He has five new kinds of flowers. A reverse transcription assay for DNA binding protein (SSB) was established. The multi-site cleavage type is arranged in a specific way, and the "Eendo SceI" is arranged in a specific way, and the "Eendo SceI" is arranged in a specific way. IS1, Tn, T The position of transgenes and the role of transgenes in the production of transgenes are indicated by the specific transgenes in meiosis. The gene product was determined by PCR in the direction of sperm cell development. The structure of the same group of transmutations is divided into two parts: copy, double lock, double lock and double lock. In eukaryotes, meiosis is a process in which the types and organisms of meiotic transmutations are analyzed, and the dynamics of promoter and inhibitor factors on the same chromosome are analyzed.