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高等植物の減数分裂誘導と決定機構の分子生物学的研究

高等植物减数分裂诱导与决定机制的分子生物学研究

基本信息

批准号：
08273213
负责人：
堀田康雄
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08273213/
关键词：
減数分裂遺伝子組み換え遺伝子発現

项目摘要

減数第一分裂特異的(対合期)に発現する遺伝子群のうち7種の遺伝子産物に対する抗体の作製を試み、詳しい解析を行った。これらのうち、低分子熱ショック蛋白質と相同性を示すLIM10遺伝子産物について、LIM10のみを特異的に認識する抗LIM10モノクローナル抗体を用いて調べたところ、LIM10蛋白質は花粉母細胞の細胞質にのみ存在することが判明した。花粉母細胞特異的に高レベルで発現する遺伝子は未報告であり、LIM10遺伝子はその発現制御機構の面からも注目された。LIM13遺伝子産物は既知の蛋白質のアミノ酸配列と相同性を示さない新規な蛋白質であると考えられる。抗LIM13抗体を用いたウエスタン法と蛍光抗体法による解析結果からは、LIM13蛋白質は減数分裂期に発現する全く新しいタイプの核あるいは染色体構成蛋白質であると考えられた。さらに、GFPとLIM13の融合遺伝子を作成し核局在シグナルの同定を行い、LIM13由来の核局在シグナルがタマネギ表皮細胞でも機能することが確認された。同様に、機能未詳なLIM4、LIM14、LIM16、LIM17についても組換え蛋白質を用いて抗体を作成し、それらの発現時期などをウエスタン法で調べた。LIM4蛋白質の蓄積は減数第一分裂厚糸期から始まり、未成熟花粉の形成に至る過程で増加する傾向があることから、LIM4蛋白質は減数分裂よりも花粉形成に関与するものと考えられた。LIM14蛋白質は出現時期の特異性と蛍光抗体法により細胞内所在から花粉成熟期に生成する蛋白顆粒を形成することが示唆された。LIM16およびLIM17蛋白質は減数第一分裂中期から四分子期以降にかけて出現し、mRNAの発現パターンと大きな違いが観察されたことから転写後発現制御が行われている可能性が考えられた。

The first meiosis specific (mating phase) gene subpopulation was detected and all seven gene products were analyzed in detail The identity of LIM10 protein was demonstrated by the identification of LIM10 protein products and the identification of LIM10 protein in pollen mother cell cytoplasm. Pollen mother cell-specific high level of development of the daughter is not reported, LIM10 daughter and development of the control mechanism of the face of attention LIM13 gene product is a new protein that has been shown to be identical to known proteins. Anti-LIM 13 antibodies were analyzed by the method of light antibody and the method of light antibody. LIM13 protein was detected at meiosis stage. In addition, the fusion gene of GFP and LIM13 was produced and the nuclear authorities in the same process and origin of LIM13 were confirmed to be functional in the epidermal cells. LIM4, LIM14, LIM16 and LIM17 are the same, but their functions are unknown. The accumulation of LIM4 protein is related to the beginning of meiosis, the process of immature pollen formation and the process of meiosis. LIM-14 protein is specific for its appearance, and light antibody assay is used to detect protein particle formation from its location in cells to pollen maturation. LIM16 and LIM17 protein are detected in the first meiotic metaphase, and mRNA expression is detected in the fourth meiotic metaphase.