複製終結点付近に見られる高頻度相同的組換え機構

在复制终止点附近观察到的高频同源重组机制

• 批准号: 03267212
• 负责人: 堀内 嵩
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03267212/
• 关键词: 複製終結点; 複製フォ-ク; ホットスポット; 相同的組換え; RNase H; Chi^+配列

現在まで多くの生物の染色体上に、他の部位より組換え頻度が上昇した。いわゆるホットスポットが見出され解析されてきた。しかしその部位がとのような要因や機構によってホットスポットとなり得るかについてはほとんど不明のままといってよい。この特異な部位の同定と構造解析、さらに要因の解明を通して、相同的組換えの分子機構に迫ることが可能となろう。我々は大腸菌のRNase H欠損変異株で働く新しい複製開始点の研究を進めているうち、この株の複製終結領域に非常に活性の高いホットスポットを多数見いだした。その解析が本研究の目的である。まず大腸菌RNase H欠損変異株において見出した8種のホットスポット部位のうち、1種を除き全て複製領域に位置しており、しかも終結点のごく近傍に位置するものが多かった。そこで宿主として終結反応が欠損した株を用いて調べたところ、ホットスポットは2種類にわかれ、3つのホットスポット(HotA,B,C)は、その活性が終結反応に依存し、残りは依存しなかった。さらに、すでに微視的なホットスポットとして知られるChi^+配列と本研究のホットスポット(HotA)との関係を詳しく調べたところ、HotA活性にはChi^+配列が必須なことが判明した。以上の結果から、終結点で阻止された複製フォ-ク部位に、RecBCD酵素がアクセスすることが強く示唆された。

Nowadays, the frequency of <s:1> and other <s:1> sites on the chromosomes of まで many く <s:1> organisms <s:1> is increasing が and the frequency of よ <s:1> group replacement え is also rising た and た た. Youdaoplaceholder0 わゆるホットスポットが see され analysis されて た た. し か し そ の parts が と の よ う な by や institutions に よ っ て ホ ッ ト ス ポ ッ ト と な り have る か に つ い て は ほ と ん ど unknown の ま ま と い っ て よ い. の こ の specific な parts with と structure, さ ら の に will interpret を tong し て, the same group in え の molecular agencies forced に る こ と が may と な ろ う. I 々 は coliform の RNase H owe loss - different strains で 働 く new し い copy starting point を の research into め て い る う ち, こ の strains の cloning end に very high に active の い ホ ッ ト ス ポ ッ ト を most see い だ し た. Youdaoplaceholder0 そ analysis が objective of this study である. ま ず coliform RNase H owe loss - different strains に お い て shows し た eight の ホ ッ ト ス ポ ッ ト parts の う ち, 1 kind of を except き full て replication domain に し て お り, し か も endpoints の ご く nearly position alongside に す る も の が more か っ た. そ こ で host と し て end against 応 が owe loss し た を strains with い て adjustable べ た と こ ろ, ホ ッ ト ス ポ ッ ト は 2 kinds に わ か れ, 3 つ の ホ ッ ト ス ポ ッ ト (HotA, B, C) は, そ の active が end against 応 に dependent し and residual り は dependent し な か っ た. さ ら に, す で に micro visual な ホ ッ ト ス ポ ッ ト と し て know ら れ る Chi ^ + assortment と this study の ホ ッ ト ス ポ ッ ト (HotA) と の masato is を detailed し く adjustable べ た と こ ろ, HotA activity に は Chi ^ + assortment が must な こ と が.at し た. の above results か ら, endpoint で stop さ れ た copy フ ォ - ク parts に, RecBCD enzyme が ア ク セ ス す る こ と が く and shown strong sucking さ れ た.

项目成果

小林 武彦: "Identification of a site reguired for DNA replication fork blocking activity in the RDNA gene cluster in S.cerevisiae" Molecular and General Genetics. (1992)

Takehiko Kobayashi：“酿酒酵母 RDNA 基因簇中 DNA 复制叉阻断活性所需位点的鉴定”《分子与普通遗传学》（1992 年）。

日高 真純: "Termination complex in Escherichia coli inhibits SV40 DNA replication in vitro by impeding the action of Tーantigen helicase." Journal of Biological Chemistry. (1992)

Masumi Hidaka：“大肠杆菌中的终止复合物通过阻碍 T 抗原解旋酶的作用来抑制 SV40 DNA 复制。”（1992 年）《生物化学杂志》。

堀内 嵩: "大腸菌の複製終結領域では何が起っているか" Cell Science. 7. 907-914 (1991)

Takashi Horiuchi：“大肠杆菌复制终止区发生了什么”《细胞科学》7. 907-914 (1991)。

日高 真純: "A new identified DNA replication terminuo site,TerE,on the Escherichia coli chromosome" Journal of Bacteriology. 173. 391-393 (1991)

Masumi Hidaka：“大肠杆菌染色体上新鉴定的 DNA 复制末端位点 TerE”《细菌学杂志》173. 391-393 (1991)。

堀内 嵩: "複製はどのように終結するか" 生化学. 63. 1185-1195 (1991)

Takashi Horiuchi：“复制如何终止？” 63. 1185-1195 (1991)