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染色体GC含量を制御するミュ-テ-タ-遺伝子(mut T)の分子遺伝学的研究

控制染色体GC含量的突变基因（mut T）的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
01618511
负责人：
堀内嵩
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01618511/
关键词：
ミュ-テ-タ-大腸菌 GC含量 dGTPase DNAポリメラ-ゼIII

项目摘要

生物界に現存するゲノムDNAのGC含量は、広い範囲(25%〜75%)に分布している。しかし進化の過程における。このGC含量の大きな変動の要因について現在でも未知のままである。我々はこの要因の一つとして考えられる大腸菌ミュ-テ-タ-(mutT)遺伝子の解析を進めてきた。というのは、このミュ-テ-タ-は、A:T→C:Gへの一方向のトランスバ-ジョン型変異みのを上昇させるからである。実際、mutTミュ-テ-タ-株の長時間培養により、その染色体GC含量が増加することが確認されているからである。我々はこのMutTタンパク質の酵素活性を同定することから、A:T→C:Gへの特異的なトランスバ-ジョン変異生成の分子レベルでの機構を知ることができると考えた。そのため、mutT遺伝子をクロ-ニングし、その遺伝子構造を明らかにするとともに、MutTタンパク質を過剰生産させ、その精製を行った。この精製試料を用いて生化学的解析を行い、以下の結果を得た。上記トランスバ-ジョン変異生成の中間体として、dA:dGミスマッチ塩基対が予想される。実際、立体異性体のanti型dAMPとsyn型dGMPとがワトソン-クリック型塩基対合を形成しうるとするモデルが提出されている。このミスマッチをDNAポリメ-ラゼIIIが、実際形成できることを確かめた。つまりテンプレ-トにpoly(dA)、プライマ-にpoly(dT)、基質としてdGTPのみを用いた時、低頻度ながらdGMPの取込みが認められた。驚ろいたことに、この取込みを精製MutTタンパク質が完全に抑制することを見出した。この実験は、mutT変異株の表現型をよく説明できる。つまりMutTタンパク質が前駆体の中にあるsyn型dGTP分子を認識し、分解(dGTPase)していると考えると全て説明できる。その後の結果もこの予想とよく一致した。ただ現時点で、syn型dGTPではなく、微量のdGTP類似分子の存在と関与を否定はできていない。

The GC content of existing DNA in the biological world varies from 25% to 75%. The process of evolution. The main reason for this change in GC content is unknown. I am going to make progress in the analysis of the Mie-Te-Ta-(mutT) heritage of Escherichia coli. A: T → C: G → G: G → G: G: G → C: G: G: G → G: G → G: G: In fact, the increase of chromosome GC content during long-term culture of mutT strains was confirmed. A: T → C: G → A: T → C: G → A: T → C → C → G → C → G → G →The structure of the gene is characterized by its purity, purity and purity. The following results were obtained from the biochemical analysis of the refined sample. Note that the above intermediate is prepared by reaction of different substances. In fact, anti-type dAMP and syn-type dGMP of stereoisomers are formed in the presence of a solid-type matrix. This is the first time I've seen a woman's face. When Tamarenplei-ton poly (dA), Plagima-ni poly (dT), and substrate dGTP are used, the need for low-frequency dGMP is recognized. In the middle of the night, the sun rises, the sun rises. The phenotype of the mutant is described in detail. The understanding and decomposition of dGTP molecules in the precursor are discussed. The result is that they want to be consistent. The existence of trace dGTP-like molecules is related to the current point, syn type dGTP, and negative.