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SOS応答におけるシグナル分子産生の分子機構

SOS反应中信号分子产生的分子机制

基本信息

批准号：
07253229
负责人：
堀内嵩
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07253229/
关键词：
大腸菌ストレス応答複製フォーク阻害点 SOS誘導

项目摘要

大腸菌のSOS応答はストレス応答の代表例では有るものの、その始動のステップの分子機構は充分解っていない。その一つの原因は系の複雑さにある。我々は系の単純化のため、染色体上の複製フォーク阻害点(Ter)を利用した。このフォーク阻害活性は、Ter-Ter結合(Tus)タンパク質との複合体形成により発現される。これまでの研究からこのTer-Tus複合体によるフォーク阻害の結果、SOS誘導が起こることを明らかにしている。本年度は蛋白工学研の鎌田・森川両氏との共同研究により、このTerとTer複合体の結晶化に成功し、その立体構造を明らかにしつつある。今後他のDNA結合タンパク質との構造比較により、Tus特異的なフォーク阻害の機構を明らかにする一方フォーク阻害を起こさない一般のDNA結合タンパク質の構造的共通性の有無をも明らかにできると考えている。一方Ter部位でのフォーク阻害によって誘導されるSOS反応のうち、特に初期反応を明らかにするためには、大腸菌染色体よりもプラスミドを用いる方が優れている。そのためプラスミドに合成したTer配列を挿入し、フォーク阻害が起こるプラスミドを作製した。またこれとは別に、Tusタンパク質の発現をON-OFFにする目的でアラビノースプロモーター下にtus遺伝子を挿入した発現プラスミドを作製した。この2種のプラスミドを、tus^-株へ導入し、アラビノース添加によりTusタンパク質が誘導され、その結果プラスミドの複製がTer部位で阻害され、SOSが誘導される系を作った。現在この系を用いて、フォーク阻害とSOS誘導の関係を調べているが、これまでにプラスミドの複製開始点(ori)からTerまでの距離とSOS誘導のレベルに相関があるという予備的結果を得ている。この系を用いてSOS誘導の基本的な初期反応を本年度中に明らかにしたい。

There is a representative example of how to respond to a SOS call. There are two kinds of drugs, one is to start a drug, and the other is to make sure that the molecular organization can fully solve the problem. The reason for this is that it is a copy. We are responsible for the utilization of Ter on chromosomes, which are the most important genes in the chromosome. The antitumor activity was detected by Ter-Ter binding (Tus). The complex was formed by the combination of DNA and DNA. In the study of the Ter-Tus complex, the results of the block experiment, and the SOS command, the results of the block test, the results of the study, and the results of the study. This year, the protein Engineering Research Institute, Tian Mori Kawakawa, has jointly studied the success of the crystallization of the complex of Ter and Ter, and the three-dimensional production of protein engineering. In the future, he used the DNA system to compare the system, and the Tus special system to make it clear that one side of the system is responsible for the damage. There is a general understanding of the commonality created by the combination of the DNA and the system. On one side, the Ter was detected in the first place, and the SOS was detected in the first place. In the early stage of the experiment, the chromosome of the bacteria was detected. This is the first step in the synthesis of the Ter configuration, and the first step is to block it. Please tell me what to do, and Tus will tell you what to do. If you want to do this, you will need to know that you are going to have a problem. You will need to know if you are going to make a change. You will not be able to do this. You will not be able to do so. You can copy the Ter part of the Ter by adding a copy of the Ter spool, and the Tus^-strain will be imported, and the Tus^-strain will be added to the database. At present, the system uses the system to prevent the SOS from causing the error, the starting point of the copy (ori) is different from the SOS command, and the result of the test is satisfactory. In the course of this year, we will use the SOS to guide the basic anti-economic activities in the early stages of the year.