キノリン酸による脂質過酸化亢進とラット線条体神経細胞の変性、壊死:脂質過酸化修復因子(グルタチオン・ペルオキシダ-ゼ)の変動による病変の修飾

喹啉酸诱导的脂质过氧化与大鼠纹状体神经元的变性和坏死：通过脂质过氧化修复因子（谷胱甘肽过氧化物酶）的变化来改变病变

• 批准号: 03263224
• 负责人: 渡辺 慶一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03263224/
• 关键词: ハンチントン病; キノリン酸; 神経細胞死; グリア細胞; 脂質過酸化; グルタチオン・ペルオキシダ-ゼ

“Endogenous excitotoxin"と目されているキノリン酸(QA)が、ハンチントン病の病因として有力視されていたが、その直接的機序の証明はなされていない。我々はその化学構造から、神経細胞内で脂質過酸化(LP)を発生せしめることを想定し、その可能性の追求を試みた。ラット肝細胞膜より燐脂質リポソ-ムを抽出、作製し、これをO_2の存在下で、QAとFe^<3+>-ADPとで作製した錯体と共にインキュベ-トした。その結果、QAの濃度依存性にLP増強(酸素消費の増加で観卒)が認められた。次いで、大脳組織における脂質過酸化(LP)に対する防御系として、神経細胞、およびグリアにおけるglutathione peroxidase(GSHーPO)に注目し、LP亢進的におけるその変動を免疫組織化学的に観察した。実験的なLP発生としては、確実な阻血ー再疎通(頸動脈、中大脳動脈の結紮、クロッピングとその解放)を適用した。その結果、クリッピング解放後3日で明瞭に現れた軟化巣では、神経細胞もグリアも変性、壊死に陥るものが多く、これらの細胞ではGSHーPOの染色性は消失した。なお、グリア細胞では、無処理対照群でもGSHーPOの染色は殆ど認められなかった。しかし、軟化巣周囲に防壁を作るように集積した所謂“active astrocytes"には、強いGSHーPOの染色性が発現し、これらastrocytesが軟化巣中の脂質過酸化物の拡散を防御しているものと思われた。キノリン酸の線条体への注入によってハンチントン様病変を発生せしめ得ることはBealらによって明らかにされた所である。そこで我々は上記実験結果を根拠として、キノリン酸のラット線条体への注入により発生する病変部における脂質過酸化と、その防御窪であるGSHーPOの変動を観察することにした。Bealの方法に従い150nM/lμl、450nM/lμlの投与を試みたが、量が少なかったためか、充分な病変が得られず、450nM投与で8匹中3匹に線条体縮少が見られたのみであった。再検討中である。

"Endogenous excitotoxin" refers to the direct evidence of the mechanism of "Endogenous excitotoxin"(QA) and the etiology of Huntontonton disease. The chemical structure of the brain, lipid peroxidation (LP) in the brain cells, the development of the brain, and the possibility of the brain. In the presence of O_2, QA and Fe^<3+>-ADP can be used to control the synthesis of phospholipids. The results showed that the concentration-dependence of QA increased LP (increase in acid consumption). In addition, lipid peroxidation (LP) in large tissues was detected by immunohistochemistry. The development of LP is not only applicable to the blockage and recanalization (ligation of the carotid artery and the middle artery), but also applicable to the liberation of the coronary artery. As a result, three days after the liberation of the Internet, it was clearly observed that the softening of the neurons, the loss of neuronal cells, the increase of neuronal cells, and the disappearance of GSH-PO staining in these cells. GSH-PO staining is the best way to detect the presence of GSH-PO. The so-called "active astrocytes" are concentrated in the wall of the softened tissue, and the staining of GSH-PO is strong. The astrocytes are the defense against the dispersion of lipid peracidifiers in the softened tissue. The injection of acid into the strand of the cell was carried out in the presence of the enzyme. The results of this study were summarized as follows: 1. The lipid peroxidation and GSH PO activity were observed during the injection of GSH into the plasma. Beal's method was applied to 150nM/lμl, 450nM/lμl and 150 nM/lμl. The dosage was small, the disease was sufficient, and the dosage was 450nM. The dosage was 3 out of 8. The line size was reduced. Again in the discussion.

项目成果

Makoto Nishiyama,Takashi Watanabe,Tomokatsu Hori,Natsuo Ueda,Takahiko Hada,Shozo Yamamoto,Takaaki Kirino,Hideo Tsukamoto,Keiichi Watanabe,: "The arachidonate 12ーlipoxygenase localized in the neurons,glial cells and endothelial cells of the canine brain."

Makoto Nishiyama、Takashi Watanabe、Tomokatsu Hori、Natsuo Ueda、Takahiko Hada、Shozo Yamamoto、Takaaki Kirino、Hideo Tsukamoto、Keiichi Watanabe：“花生四烯酸 12-脂氧合酶位于犬脑的神经元、神经胶质细胞和内皮细胞中。”