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温度ジャンプNMRによるヘムタンパク質多元構造のダイナミックス

通过温跃核磁共振研究血红素蛋白多维结构的动力学

基本信息

批准号：
04225214
负责人：
赤坂一之
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04225214/
关键词：
NMR 温度ジュンプマイクロ波ミオグロビン抵温変性高次構造

项目摘要

1。ラジオ波コイルを内側にマイクロ波コイルを外側にもつ設計を基本に、比較的高感度で温度ジャンプ効率のよい、マイクロ波温度ジャンプ用NMRプローブの制作に一応成功した。しかし特にスペクトル分解能、安定性において改良すべき点が残っている。2。ウマメトミオグロビンについて、0。1M酢酸に含む重水溶液中pH5。7、20-30℃ではほぼ100%天然状態を、0℃でほぼ100%抵温変性状態を実現した。400MH_zプロトンNMRスペクトルは、抵温変性状態が部分的にある種の高次構造をもつ可能性を示唆した。抵温変性状態はにおける高次構造についての詳しいスペクトル解析が進行中である。3。ウマアポミオグロビン重水溶液を対象に、1。で作製した温度ジャンプNMRプローブを用いて、0℃付近から20℃付近まで250msecの間に急激に温度をジャンプさせた。温度ジャンプ直後から数秒間時間を追って信号を採取、3分間の冷却後これを繰り返して信号を積算し、温度ジャンプ後のスペクトル変化を観測した。この結果は、高次構造形成が意外と速く、マイクロ波照射の250ミリ秒の間にほぼ完結していることを示した。抵温変性状態からの温度ジャンプによる構造形成過程を観測したのはこれが初めてであり、抵温変性状態の構造とも関連して、ミオグロビンの高次構造形成過程を考える上で興味ある知見である。

1。The design of the inner side of the wave is basic, and the high sensitivity of the temperature is compared with the production of the NMR filter. Special properties, stability, and improvement of performance 2。ウマメトミオグロビンについて、0。pH5 in 1M acetic acid in heavy water. 7, 20-30℃400MHz NMR spectrum shows the possibility of high order structure. The temperature variation state is in the process of analysis of high-order structures. 3。ウマアポミオグロビン重水溶液を対象に、1。The temperature of the sample is controlled by NMR, and the temperature of the sample is controlled by 0℃, 20℃ and 250msec. After a few seconds of temperature drop, the signal is taken, after 3 minutes of cooling, the signal is integrated, and after a few seconds of temperature drop, the signal is measured. As a result, high-order structures were formed at an unexpected speed, and the radiation time was 250 seconds. The structure formation process of temperature dependent state, temperature dependent state and higher-order structure formation process are investigated.