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圧力軸における蛋白質フォールディングの物理化学的研究

压力轴上蛋白质折叠的物理化学研究

基本信息

批准号：
04F03363
负责人：
赤坂一之
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kinki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F03363/
关键词：
アミロイドプロトフィブリル解離のキネティックスプロトフィブリル解離の活性化体積プロトフィブリル解離の活性化圧縮率アミロイドプロトフィブリルのトリプトファン蛍光ニワトリリゾチームのS-S欠損変異体高圧蛍光測定アミロイドプロトフィブリルトリプトファン蛍光圧力解離活性化体積活性化圧縮率活性化エンタルピー活性化エントロピー

项目摘要

フォールディングとアミロイド線維は蛋白質の二つの安定形である。フォールディングについてはキネティックスの研究がこれまで盛んに行われてきたが、アミロイド形成についてのキネティックス研究はほとんど手付かずの状態である。本研究は、アミロイド線維形成の前駆体と考えられるプロトフィブリルの解離反応について、そのキネティックスを詳しく解析した最初の研究である。対象となるプロトフィブリルは、自然に変性状態にあるニワトリリゾチームのS-S欠損変異体で、圧力により加速される解離反応をトリプトファンの蛍光によりモニターした。蛍光の時間変化の解析とプロトフィブリルの線維長分布の解析から、プロトフィブリルの成長と消滅は、線維の端にモノマーが付加するのと線維の端からモノマーが解離するのとよりなるlinear polymerization mechanismにより進行することを明らかにした。また、解離速度の圧力依存性の解析から、解離の活性化体積が負(?V^<o‡>=-50.5?1.60ml mol^<-1>)で、活性化圧縮率も負であることが明らかになった。一方、高圧NMR実験から、平衡状態では、プロトフィブリルの解離に伴う体積変化が、およそ?V^o=-100ml mol^<-1>である。プロトフィブリルの体積パラメータが詳しく測定されたのはこれが初めてである。これらの一連の体積パラメータから、プロトフィブリルはもともと空隙を伴う比較的高い体積状態にあり、揺らぎによってかなりの水和が進行する活性化状態に達し、さらにより完全に水和した低体積のモノマーに解離する、と予想される。この成果はアミロイドプロトフィブリル及びその解離に関して初めての体積パラメータからの解析であり、その実験方法とともに、今後のアミロイド線維機構の解析について、貴重な示唆を与える研究成果であるといえる。

The protein content of the protein is stable. The study of the problem of the problem. This study analyzes the precursor of linear dimension formation in detail. For example, if you want to change the color of the image, you can change the color of the image by changing the color of the image. The analysis of the temporal variation of light and the analysis of the linear dimension distribution of light and the growth and elimination of light and the end of light. Analysis of pressure dependence of dissociation velocity and activation volume of dissociation V^<o‡>=-50.5? 1.60ml mol^<-1>), activation pressure reduction rate One side, high pressure NMR, equilibrium state, equilibrium state, V^o=-100ml mol^<-1>である。The volume of the film is measured in detail. The volume of water in the system is relatively high, and the volume of water in the system is relatively high. The activation state of water in the system is relatively high, and the volume of water in the system is relatively low. The results of this research include the analysis of the volume of the first phase of the first phase of the second phase of the second phase of the third phase of the fourth phase of the third phase of the fourth phase of the fourth phase of the fourth