课题基金 / 基金详情

温度ジャンプNMRを用いた金属タンパク質の多元的構造と反応過程制御の研究

温度ジャンプNMRを用いた金属タンパク質の多元的構造と反応過程制御の研究
温跃核磁共振研究金属蛋白多维结构及反应过程控制
批准号：
03241213
负责人：
赤坂 一之
金额：
$1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1991 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03241213/
关键词：
NMR温度ジャンプ金属タンパク質ミオグロビン低温変性高次構造形成

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
1.市販品を精製して得たウマ心臓メトミオグロビンについて、30mg/mlの高濃度でも可逆的に変性が起こる条件を種々検討した結果、重水溶液中pH5.35前後で2MUreaを共存させることにより、且つ低温変性を利用することによってこれが可能であることがわかった。2.上記条件下でのミオグロビンを0℃で一定時間低温変性状態に保った後、35℃に急速に昇温することにより誘起される天然構造の形成過程を温度ジャンププロトンNMRにより追跡した.その結果、ポリペプチド鎖全体がほぼ同時に協同的に巻き戻ることがわかった。その平均時定数は0℃に30分後保った場合210秒であった。この高次構造形成の速度は低温変性状態での保持時間に存在する。このことは低温変性に少なくとも二つの状態が存在することを示唆している。3.ここで観測されたミオグロビンの高次構造の形成はヘムとの相互作用によりもたらされたものである。高次構造の完結に先立ってヘムとアポ蛋白質との間で何らかの会合中間体が形成され、いくつかの段階を経て最終的な構造が形成されるものと考えられるが、これまでのところこのような中間体のスペクトルを特定するには至らなかった。4.以上の実験によって温度ジャンプNMRに適した実験系と実験条件を確立することができた。今後は高速温度ジャンプNMR検出器を用いて、速い過程で形成される多元的構造中間体の研究を行う予定である。
英文摘要
1.市販品を精製して得たウマ心臓メトミオグロビンについて、30mg/mlの高濃度でも可逆的に変性が起こる条件を種々検討した結果、重水溶液中pH5.35前後で2MUreaを共存させることにより、且つ低温変性を利用することによってこれが可能であることがわかった。2.上記条件下でのミオグロビンを0℃で一定時間低温変性状態に保った後、35℃に急速に昇温することにより誘起される天然構造の形成過程を温度ジャンププロトンNMRにより追跡した.その結果、ポリペプチド鎖全体がほぼ同時に協同的に巻き戻ることがわかった。その平均時定数は0℃に30分後保った場合210秒であった。この高次構造形成の速度は低温変性状態での保持時間に存在する。このことは低温変性に少なくとも二つの状態が存在することを示唆している。3.ここで観測されたミオグロビンの高次構造の形成はヘムとの相互作用によりもたらされたものである。高次構造の完結に先立ってヘムとアポ蛋白質との間で何らかの会合中間体が形成され、いくつかの段階を経て最終的な構造が形成されるものと考えられるが、これまでのところこのような中間体のスペクトルを特定するには至らなかった。4.以上の実験によって温度ジャンプNMRに適した実験系と実験条件を確立することができた。今後は高速温度ジャンプNMR検出器を用いて、速い過程で形成される多元的構造中間体の研究を行う予定である。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
木村 雅晴: "水溶液系の温度ジャンプNMRにおける温度指標とジャンプ効率" 第30回NMR討論会 講演要旨集. 30. 155-158 (1991)
Masaharu Kimura：“水溶液温度跳跃 NMR 中的温度指数和跳跃效率”第 30 届 NMR 研讨会摘要。 30. 155-158 (1991)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
赤坂 一之: "温度ジャンプNMRによるタンパク質の構造転移" 生物物理 第29回年会講演予稿集. 31. S90 (1991)
Kazuyuki Akasaka：“通过温度跳跃 NMR 进行蛋白质的结构转变”第 29 届生物物理学年会记录 31. S90 (1991)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kazuyuki Akasaka: "A Novel Method for NMR Spectral Correlation between the Native and the Denatured States of a Protein.Application to Ribonuclease A" Journal of the American Chemical Society. 113. 4688-4689 (1991)
Kazuyuki Akasaka：“一种蛋白质天然状态和变性状态之间 NMR 谱相关性的新方法。在核糖核酸酶 A 中的应用”美国化学会杂志。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
野口 純: "温度ジャンプによるミオグロビンの構造形成" 日本化学会第63春季年会講演予講集. (1992)
Jun Noguchi：“温度跳跃导致肌红蛋白的结构形成”日本化学会第 63 届春季年会论文集（1992 年）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
圧力軸実験を主とするアミロイド形成と解離メカニズムの研究
  • 批准号：
    18031040
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $8.06万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    赤坂 一之
  • 依托单位：
    Kinki University
圧力軸における蛋白質フォールディングの物理化学的研究
  • 批准号：
    04F03363
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    赤坂 一之
  • 依托单位：
    Kinki University
蛋白質の水和と熱励起構造
  • 批准号：
    16041244
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $8.51万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    赤坂 一之
  • 依托单位：
    Kinki University
高圧NMRによる蛋白質構造とダイナミックスの研究
  • 批准号：
    99F00183
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.34万
  • 财政年份：
    1999
  • 负责人：
    赤坂 一之
  • 依托单位：
    Kobe University
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