抗ガン活性金属錯体による活性酸素生成とDNA切断反応

抗癌活性金属配合物产生活性氧和DNA裂解反应

• 批准号: 05209230
• 负责人: 桜井 弘
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05209230/
• 关键词: 生物無機化学; ポドフイロトキシン; 金属錯体; DNA切断; 活性酸素

我々は、ポドフィロトキシン(PD)及びその誘導体(例えば、VP-16,VM-26)によるDNA切断反応機構に対して、金属との錯体形成に基づく活性酸素種(・OHなど)の関与について検討してきた。本研究においては、PDの構成分子としてのシリンガ酸(SA)及びPDの脱メチル体(デメチルエピポドフィロトキシン、DEPD)とCu(II)イオンとの錯体によるDNA切断及びその認識における分子間相違性について考察した。両錯体とDNAとの結合定数(Km)をUV吸収差スペクトルから求めたところ、Cu(II)-DEPD錯体はCu(II)-SA錯体よりも10倍以上強くDNA分子に結合し、インターカレーション以外によるDNAへの結合様式の存在が推察された。また、プラスミドColElDNAに対する切断反応に対して、Cu(II)-DEPD錯体はCu(II)-SA錯体よりもより濃度依存的な切断傾向を示した。このことは、DNA認識に対するDEPDのA,B,C及びD環の働きを強く示唆するものと考えた。また、M13mp18DNAを用いるDNAシーケンス法による解析の結果、Cu(II)-DEPD錯体はGCリッチな配列におけるG及びC塩基に、Cu(II)-SA錯体はC塩基においてのみ特異的な切断(あるいは結合)位置を示した。また、DEPD及びSAのDNA認識・切断の違いを見いだすため、ColElDNAの制限酵素Pvu IIあるいはTaqI消化によるフラグメント(それぞれ371〜4863bpあるいは123〜988bpフラグメントを生成)を用いて検討した。いずれのフラグメントに対してもCu(II)-DEPD錯体の法がより強い切断活性を示した。

I cut the DNA of 々は, ポドフィロトキシン (PD) and びその derivatives (such as えば, VP-16, VM-26) It breaks the reaction mechanism of the に対して and the metal との complex to form the に-based づく active acid species (・OHなど) and the について検検曰してきた. In this study, the constituent molecules of SA and PD are SA and PD.ン、DEPD)とCu(II)イオンとの无码によるDNA cleavage and びそのcognition におけるIntermolecular contradiction についてinvestigationした.両Multiple body and DNA binding constant (Km) をUV absorption difference スペクトルから看めたところ、Cu(II)-DEPD misbody はCu(II)- It is speculated that the existence of SA molecule binding to DNA molecules is 10 times stronger than that of SA, and there are DNA-binding formulas other than インターカレーション.また, プラスミドColElDNA cleavage reaction に対して, Cu(II)-DEPD molecule はCu(II)-SA molecule よりもより concentration-dependent cleavage tendency is shown.このことは, DNA recognition に対するDEPDのA, B, C and びD ring の働きを强く Show するものとtest えた.また, M13mp18DNA was analyzed using the いるDNA シーケンス method, and the result of Cu(II)-DEPD mismatched GC was analyzed The specific な cleavage (あるいは binding) position of the におけるG and びC塩に, Cu(II)-SA complex body はC塩 radical においてのみ is shown in the figure.また、DEPD and びSAのDNA recognition・cutting のviolationいを见いだすため、ColElDNAのrestriction enzyme Pvu II あるいはTaqI digestion によるフラグメント(それぞれ371~4863 bpあるいは123~988bpフラグメントをgenerated)を用いて検同した.いずれのフラグメントに対してもCu(II)-DEPD complex body の法がよりstrong いCut active をshow した.

项目成果

Kunihiko Tajima: "Cyrochroms P-450-Butyl Peroxide Complex Detected by ESR" Biochem.Biophys.Res lommun. 191. 157-164 (1993)

Kunihiko Tajima：“通过 ESR 检测到的 Cyrochroms P-450-丁基过氧化物复合物”Biochem.Biophys.Res lommun。

Atsure Yamashita: "Site-speespic DNA-cheasage by Cu(II)complexos of podophyllotoxin derivatines" Biochem.Phaumarol.(印刷中). (1994)

Atsure Yamashita：“鬼臼毒素衍生物的 Cu(II) 复合物的位点特异性 DNA 切割”Biochem。（1994 年出版）。

Hiromu Sakurai: "Vanaaeum Distrokution in Rats and DNA clcaoeyl by Vamadyl conprex:implication for Vanadium Toociclty anrol Biologiral Effeets" Enoirom.Heaeth Perspect Suppl. 102(印刷中). (1994)

Hiromu Sakurai：“Vanaaeum Distrokution in Rats and DNA clcaoeyl by Vamadyl conprex：Vanaadium Toociclty anrol Biologiral Effeets” Enoirom.Heaeth Perspect Suppl. 102（出版中）。

桜井 弘: "生態微量元素" 廣川書店, 376頁 (1994)

樱井宏：《生态微量元素》广川书店，376页（1994年）