接着分子カドヘリンを介した内皮細胞間接着の制作機構

粘附分子钙粘蛋白介导的内皮细胞粘附机制

• 批准号: 05256232
• 负责人: 月田 承一郎
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05256232/
• 关键词: カドヘリン; 内皮細胞; 血管; 細胞接着; alpha‐カラニン; リン酸化; がん細胞; サイトカイン

血管内皮としては、培養細胞(マウスの樹立株およびヒトの初代培養)を用いた。1.間接蛍光抗体法により内皮細胞間のカドヘリンを介した接着部位を可視化し、接着部位の解離過程の観察を行った(担当:月田承)我々が得たカドヘリン裏打ち蛋白質に対する抗体を用いた。特にCAP102(alpha‐catenin)に対する抗体は内皮細胞間の接着部位を明瞭に染めた。培養内皮細胞に種々のサイトカインの存在下で種々の血球細胞や癌細胞を重層し、内皮細胞間の接着が解離する条件を探り、解離の様式と時間経過を解析した。2.内皮細胞に特異的なカドヘリン分子の同定を試みた(担当:永淵昭良)alpha‐cateninはカドヘリン分子に強く結合しており、抗体で免疫沈降を行うとカドヘリン分子が共沈する。この手法を用いて、これまでいろいろな方法で同定が難しかった内皮細胞カドヘリンの分子としての同定を試みたが、現在のところうまくいっていない。3.内皮細胞間の解離の分子機構を解析した(担当:月田早智子)内皮細胞間が解離する場合、カドヘリン分子の接着機能が細胞質側から制御されると考えられる。このような制御は内皮細胞以外の細胞種でも存在することが知られているが、その分子機構は明らかでない。内皮細胞の系を用いて、特にカドヘリン裏打ち蛋白質の燐酸化という側面からこの制御機構を解析した。

For vascular endothelium, と is used for て て, and for cultured cells (て ウス <s:1> for establishing a <s:1> strain およびヒト for primary culture), を is used for た た. 1. Indirect light 蛍 antibody technique に よ り between endothelial cells の カ ド ヘ リ ン を interface し た を visualization し then parts and then の の dissociation process line 観 examine を っ た Tian Cheng (bear: month) I 々 が have た カ ド ヘ リ playing ち ン protein に す seaborne を る antibody with い た. Specifically, にCAP102(alpha-catenin)に against する antibody に the <s:1> junction site between endothelial cells を indicates に staining めた. Develop endothelial cells に 々 の サ イ ト カ イ ン の で kind of in the presence of 々 の や cancer cells を heavy layer し blood cells, endothelial cells の then す が dissociation between り を る conditions and dissociative の others type と time 経 を parsing し た. 2. Endothelial cells に specific な カ ド ヘ リ の ン molecules with fixed を try み た (bear: deep zhao good) alpha ‐ catenin は カ ド ヘ リ ン strong molecular に く combining し て お で り, antibody immune sink を line う と カ ド ヘ リ が ン molecules were shen す る. こ の gimmick を with い て, こ れ ま で い ろ い ろ で な method with fixed が difficult し か っ た endothelial cells カ ド ヘ リ ン の molecular と し て の with fixed を try み た が, now の と こ ろ う ま く い っ て い な い. 3. の の dissociation between endothelial molecular institutions を parsing し た naokou) (bear: month field early が dissociation between endothelial cells す る occasions, カ ド ヘ リ ン molecular の then function が cytoplasmic side か ら suppression さ れ る と exam え ら れ る. こ の よ う な suppression は outside の endothelial cells of で も exist す る こ と が know ら れ て い る が, そ の molecular institutions は Ming ら か で な い. Endothelial cells の is を with い て, に カ ド ヘ リ playing ち ン protein の 燐 acidification と い う side か ら こ の system royal institution を parsing し た.

项目成果

Furuse,M.: "Occludin:A novel integral membrane protein localizing at tight junctions." J.Cell Biol.123. 1777-1788 (1993)

Furuse,M.：“Occludin：一种位于紧密连接处的新型整合膜蛋白。”

Hashimoto,T.: "Desmoyokin,a 680OKDa keratinocyte plasma membraneassociated protein,is homologous to the protein ecoded by AHNAK." J.Cell Sci.105. 275-286 (1993)

Hashimoto,T.：“Desmoyokin，一种 680OKDa 角质形成细胞质膜相关蛋白，与 AHNAK 编码的蛋白同源。”

Tskeuchi,K.: "Perturbation of cell adhesion and microvilli formation by antisense oligonucleotides to ERM family members." J.Cell Biol.(in press). (1994)

Tskeuchi,K.：“ERM 家族成员的反义寡核苷酸对细胞粘附和微绒毛形成的干扰。”

Tsukita,S.: "The 220KD protein colocalizing with cadherins in nonepithelial cells is identical to zo‐1." J.Cell Biol.121. 491-502 (1993)

Tsukita, S.：“非上皮细胞中与钙粘蛋白共定位的 220KD 蛋白与 zo-1 相同。”J.Cell Biol.121 (1993)。

Tsukita,Sa.: "ERM family members as molecular linkers between the cell surface glycoprotein CD44 and actin filaments." J.Cell Biol.(in press). (1994)

Tsukita,Sa.：“ERM 家族成员作为细胞表面糖蛋白 CD44 和肌动蛋白丝之间的分子连接物。”