細胞間ー接着制御蛋白質と細胞の増殖・転移機構

细胞间粘附控制蛋白和细胞增殖和转移机制

• 批准号: 02152136
• 负责人: 月田 承一郎
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152136/
• 关键词: 細胞接着; ビンキュリン; ラディキシン; エズリン; band4.1; チロシン; シグナル伝達

細胞間接着の制御機構とシグナル伝達機構を明らかにする目的で単離AJ(adherens junction)を用いた解析を進めた。Radixinは単離AJの裏打ち構造に局在するアクチンフィラメントのbarbedーend capping蛋白質として我々が同定したものである。本年度はradixinのcDNAの単離を試みた。得られたcDNAはezrinと高いホモロジ-を示した。ezrinは、EGFレセプタ-などの基質として注目されている蛋白質で赤血球膜の裏打ち蛋白質band4.1のファミリ-に属する。band4.1蛋白質は、そのN末端側で膜蛋白質glycophorinと結合することが知られている。Radixinは、band4.1蛋白質のglycophorin結合部位を含んでおり、AJにおいてもglycophorin様蛋白質と結合することによりアクチンフィラメントを細胞膜に結合させているものと思われた。次に、カドヘリン結合蛋白質である102kDタンパク質(CAP102)を単離AJより精製し、抗体を作製し、そのcDNAを単離した。得られたcDNAの塩基配列を決定したところ、非常に興味深いことに、この蛋白質がビンキュリンとホモロジ-があることが分かり、カドヘリン分子はCAP102を介してビンキュリンを含む裏打ち構造と強く結合していることが示唆された。最後に、チロシンフォスファタ-ゼの阻害剤であるバナジン酸で組織をあらかじめ還流しておいてから、抗燐酸化チロシン抗体による蛍光抗体染色を行ったところ、AJが見事に染め出されることを見い出した。このことは、成体の細胞で、AJの裏打ち構造が最もチロシン燐酸化活性の高い場所であること、そして、チロシンフォスファタ-ゼ活性もきわめて高いことを示している。AJにおいてこれだけの活性が濃縮している理由を明らかにすることが、接着情報の伝達や接着の制御などの機構を解明する上で重要なポイントとなると思われる。

Cells with indirect の system royal institution と シ グ ナ ル 伝 of institutions を Ming ら か に す る purpose で 単 from AJ (adherens junction) を with い た parsing を into め た. Playing ち Radixin は 単 from AJ の tectonic に bureau in す る ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト の barbed ー end capping protein と し て I 々 が be し た も の で あ る. In the current year, 単 radixin cDNA clones are を and みた. The られたcDNA と ezrinと is high and ホモロジ ホモロジ-を shows that た た. Ezrin は, EGF レ セ プ タ - な ど の matrix と し て attention さ れ て い で る proteins play ち protein in red blood cell membrane の band4.1 の フ ァ ミ リ - に genus す る. The band4.1 protein そ and そ で n-terminal side で membrane protein glycophorinと bind to する られて とが とが and られて る. Radixin は, band4.1 protein の glycophorin combining site contains を ん で お り, AJ に お い て も glycophorin others in protein と combining す る こ と に よ り ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト を に combined with cell membrane さ せ て い る も の と think わ れ た. に, カ ド ヘ リ ン binding protein で あ る 102 kd タ ン パ ク mass (CAP102) を 単 from AJ よ り refined し, antibody を し, そ の cDNA を 単 from し た. Have ら れ た cDNA の salt base with column を decided し た と こ ろ, very deep に tumblers い こ と に, こ の protein が ビ ン キ ュ リ ン と ホ モ ロ ジ - が あ る こ と が points か り, カ ド ヘ リ ン molecular は CAP102 を interface し て ビ ン キ ュ リ ン を containing playing ち む structure strong と く with し て い る こ と が in stopping さ れ た. Final に, チ ロ シ ン フ ォ ス フ ァ タ - ゼ の resistance against tonic で あ る バ ナ ジ ン acid で organization を あ ら か じ め also flow し て お い て か ら, resisting 燐 acidification チ ロ シ ン antibody に よ る 蛍 light line antibody staining を っ た と こ ろ, AJ が に dye め see things out さ れ る こ と を see い out し た. こ の こ と は, adult の cell で, AJ の play ち tectonic が most も チ ロ シ ン 燐 acidification place high active の い で あ る こ と, そ し て, チ ロ シ ン フ ォ ス フ ァ タ actiity ゼ も き わ め て high い こ と を shown し て い る. AJ に お い て こ れ だ け の active が enrichment し て い る reason を Ming ら か に す る こ と が, then intelligence の 伝 da や then の suppression な ど の institutions を interpret す る で important な ポ イ ン ト と な る と think わ れ る.

项目成果

Tsukita,Sa.: "Specific protoーoncogenic tyrosine kinases of src family are enriched in cellーtoーcell adherens junctions where the level of tyrosine phosphorylation is elevated." J.Cell Biol.

Tsukita,Sa.：“src 家族的特定原癌酪氨酸激酶在细胞间粘附连接处富集，其中酪氨酸磷酸化水平升高。”

Muto,E.: "Doubleーrowed organization of inner dynein arms in Chlamydomonas flagella revealed by tiltーseries thinーsection electron microscopy." J.Cell Sci.

Muto，E.：“通过倾斜系列薄切片电子显微镜揭示衣藻鞭毛内动力蛋白臂的双排组织。”

Tsukita,Sh.: "The undercoat of adherens junctions:A key specialized structure in organogenesis and carcinogenesis." Cell Struct.Funct.15. 7-12 (1990)

Tsukita，Sh.：“粘附连接的底毛：器官发生和癌变中的关键特殊结构。”

Nishikawa,S.: "Localization of adherens junction proteins along the possible sliding interface between secretory ameloblasts of the rat incisor." Cell Struct.Funct.15. 245-250 (1990)

Nishikawa,S.：“粘附连接蛋白沿着大鼠门牙分泌性成釉细胞之间可能的滑动界面定位。”

Sato,N.: "Radixin,a barbedーendーcapping actinーmodulating protein,is concentrated at the cleavage furrow during cytokinesis." J.Cell Biol.

Sato, N.：“Radixin 是一种带倒刺末端的肌动蛋白调节蛋白，在胞质分裂过程中集中在裂解沟中。”