神経系培養細胞のアルツハイマー病アミロイド前駆体タンパク質の代謝の検討

培养神经系统细胞中阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白代谢的检查

• 批准号: 05261216
• 负责人: 丸山 敬
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05261216/
• 关键词: アルツハイマー病; アミロイドタンパク質; NB-1; 神経分化; 細胞死; 神経毒性; 遺伝子導入; セクレターゼ

アルツハイマー病の病理変化の一つである老人斑の主成分は、アミノ酸695-770個の前駆体(APP)に由来するアミノ酸42個程度のbeta/A4タンパク質である。当初、病的状態でbeta/A4タンパク質が生成され神経毒性をもたらすと考えられたが、近年の研究では正常でも分泌されていることが明らかにされた。アルツハイマー病の老人斑形成の過程やその神経毒性の解明のために、培養細胞で遺伝子導入によって過剰に発現させて、その代謝を調べた。サル線維芽細胞由来のCOS細胞では、DEAE-dextran法による一過性発現を行った。すでに報告されているように、セレクターゼによる分泌は確認されたが、我々の抗体ではbeta/A4タンパク質の分泌を検出できなかった。今後、さらに感度のよい抗体・検出法の樹立を試みる。ヒト神経芽細胞由来のNB-1細胞はdibutyryl cAMP(Bt2cAMP)処理によって神経突起を伸張する。未分化状態からより神経系の細胞へ分化するといえる。この細胞でelectroporationによってAPPの過剰発現系の樹立を行った。APP695の発現株は確立できたが、APP770については得られなかった。単なる技術的な問題か、APP770特有の機能を反映しているかについては検討中である。NB-1でも、主な代謝経路はセクレターゼによる分泌系であった。Bt2cAMPによって、神経突起の伸張を誘発するとAPPのmRNAレベルとAPPタンパク質発現量は数倍以上増大し、同時に細胞の変性死が観察された。いわゆるamyloidogenic断片の増大は確認されなかった。この結果から、神経細胞にとっては、過剰なAPPそのものが有害であり、神経細胞の変性にはamyloidogenic断片は必ずしも必要ないことが考えられる。今後、さらに神経系培養細胞でのAPP機能・代謝を検討していきたい。

ア ル ツ ハ イ マ ー disease pathological variations change の の a つ で あ る senile plaque の principal component は, ア ミ ノ acid 695-770 before の 駆 body (APP) に origin す る ア ミ ノ acid degree of 42 の beta/A4 タ ン パ ク qualitative で あ る. At the beginning, disease state で beta/A4 タ ン パ ク qualitative が generated さ れ god 経 toxicity を も た ら す と exam え ら れ た が, in recent years, の で は normal で も secretion さ れ て い る こ と が Ming ら か に さ れ た. ア ル ツ ハ イ マ ー disease の senile plaque formation の や そ の god 経 toxicity の interpret の た め に, culture cell で heritage 伝 son import に よ っ て before turning に 発 now さ せ て, そ の metabolic を adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 the origin of vitamin a cells: COS cells で で, DEAE-dextran method による, transient occurrence を rows った. す で に report さ れ て い る よ う に, セ レ ク タ ー ゼ に よ る secretion は confirm さ れ た が, I 々 の antibody で は beta/A4 タ ン パ ク qualitative の secretion を 検 out で き な か っ た. In the future, さらに sensitivity さらに よ よ <s:1> antibody · 検 method <e:1> establish を test みる. Youdaoplaceholder0 The origin of the nerve bud cells is NB-1 cells. Youdaoplaceholder1 dibutyryl cAMP(Bt2cAMP) treatment によって nerve protrusions を expansion する. Undifferentiated state える らよ agnotic <s:1> cells へ differentiation すると える える. <s:1> <s:1> cells でelectroporationによってAPP <s:1> overdevelopment is the establishment of を rows った. The existing strain of APP695 has been established as で で たが たが, and APP770 is に,, て, て and られな った. 単 な る な problem か, APP770 の function を reflect unique し て い る か に つ い て は 検 beg in で あ る. NB-1で で, main な metabolic pathway セ セ レタ ゼによる ゼによる secretory system であった. Bt2cAMP に よ っ て, god 経 protrusions の stretching を 発 lure す る と APP の mRNA レ ベ ル と APP タ ン パ ク quality 発 now quantity は rights し, at the same time more than a few times の に cells - sexual death が 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0 わゆるamyloidogenic fragment fragment fragment fragment fragment increase されな confirmation されな った. こ の results か ら, god 経 cell に と っ て は, turning な APP そ の も の が harmful で あ り, god 経 cell の - sex に は amyloidogenic は will fragment ず し も necessary な い こ と が exam え ら れ る. In the future, the さらに neuro-cultured cells で <s:1> APP function and metabolism を検 will be discussed for <s:1> て た た た た.

项目成果

Mihoko Usami,Wakako Yamao-Harigaya,Kei Maruyama: "The Triplet of Lysine Residues(Lys^<724>-Lys^<725>-Lys^<726>)of Alzheimer's Amyloid beta/A4 Precursor Protein Plays an Important Role in Membrane Anchorage and Processing" Journal of Neurochemistry. 61. 23

Mihoko Usami、Wakako Yamao-Harigaya、Kei Maruyama：“阿尔茨海默氏症淀粉样蛋白 β/A4 前体蛋白的赖氨酸残基三联体 (Lys^<724>-Lys^<725>-Lys^<726>) 在膜中发挥重要作用