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ヒト遺伝病のATを用いた放射線損傷に関係するDNA修復遺伝子の単離と解析

利用 AT 分离和分析与人类遗传病辐射损伤相关的 DNA 修复基因

基本信息

批准号：
05270207
负责人：
江島洋介
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05270207/
关键词：
放射線感受性 DNA修復 AT 放射線ハイブリドコスミド

项目摘要

放射線にたいする高感受性を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)はヒト細胞における遺伝子情報維持の機構を解析するためのひとつのモデル系である。このATの原因遺伝子の単離を目的とし、ヒト染色体11q23領域の解析とここからのDNAの分離を試み、以下の成果が得られた1.AT細胞への染色体移入実験からAT遺伝子の座位をヒト染色体11q23領域にマップした。この遺伝子座位近傍に転座点をもつヒトX/11転座染色体を出発材料とし、高線量のX線照射と細胞融合から、AT遺伝子座位近傍の微小な染色体断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。2.得られた放射線ハイブリドについて、ヒト特異的反復配列をプライマーとしたPCR法によりマウス細胞内でのヒトDNAを解析した。今年度購入したDNA酵素反応装置は、このPCR解析に使用した。PCRによる解析から染色体の細片化のみられたクローンについてその染色体領域を調べた。5クローンの染色体断片は11/X転座点から11S144〜11S385間に亙るものであった。さらにこれらのクローンをAT細胞に移入したところ、5クローンのうち1クローン(RH12/1)がAT細胞の放射線高感受性を相補した。3.ATの原因遺伝子を含むクローンRH12/1からゲノム・ライブラリーを作成した。作成したライブラリーから、ヒトDNAを含むクローンを選択し解析中である。

Radiation exposure is highly sensitive, it is sensitive to poor sex, it is harmful to the disease, it is sensitive to the disease (AT), the cell is sensitive, the child is sensitive, the organ is sensitive, and the system is sensitive. The cause of the AT, the cause of isolation, the purpose of isolation, the analysis of the field of chromosome 11q23, the separation of DNA, the following results, the transfer of chromosomes into AT cells, the transfer of chromosomes into chromosomes, the field of chromosome 11q23, the field of chromosome 11q23. The chromosome of the X-ray pedestal 11 was made of the material, the X-ray irradiation of the high dose, the fusion of the cells, the tiny chromosome fragments near the AT locus, the radiation lines, the radiation lines, the fusion of the cells. two。 In this paper, we can obtain the reverse configuration of the radiation line, the PCR method, the DNA analysis and the anti-configuration of the radiation line. This year, the use of DNA enzyme reverse device and PCR analysis is introduced. PCR chromosome analysis, chromosome fragmentation, chromosome analysis, chromosome analysis. 5 chromosomal fragments 11 11S144~11S385 X loci, 5 chromosomal fragments, 5 chromosomal fragments, 5 chromosomal fragments. The AT cell is moved into the cell (RH12/1) of the AT cell, which is highly sensitive and sensitive. The cause of the 3.AT contains the following words: cause, RH12/1, cause, and so on. Make it possible that you will not be able to DNA the data in the resolution.