AT(アタキシア・テランジェクタシア)の原因遺伝子の特性解析とその単離

AT（毛细血管共济失调）致病基因的表征和分离

• 批准号: 03152067
• 负责人: 江島 洋介
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03152067/
• 关键词: アタキシア・テランジェクタシア; ヒト劣性遺伝病; 高発がん性遺伝病

リンパ網内系の悪性腫瘍の好発を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)の原因遺伝子の単離を目的とし、AT遺伝子の染色体マッピングとAT遺伝子座近傍からのDNAの分離を試み、以下の成果が得られた1.AT患者由来の永代細胞株AT2KYSVを受容細胞とし、ヒト第11番染色体あるいは種々のX/11転座染色体をもつマウス細胞株を供与細胞とする染色体移入とAT細胞の放射線高感受性を指標とした解析から、AT遺伝子座位を11q23領域に同定した。2.染色体移入実験の過程で、AT座位を消失すると同時に11q23領域に微小欠失をもつヒト細胞クロ-ン2859/4ー1を得た。2859/4ー1からマウスA9細胞への微小核融合を行ない、欠失X/11転座染色体を単一に保有する1クロ-ンA9(A9(2859/4ー1)ー2)ー1を得た。3.マウス細胞内でのヒト染色体のDNAを調べるためAluーPCRによる解析を行なった。Aluプライマ-TC65を用い、第11番染色体、X染色体、X/11転座染色体を保有するA9細胞、今回作成したA9(A9(2859/4ー1)ー2)ー1、および親株A9細胞のDNA間で比較したところ、DNA増幅はヒト染色体に特異的であり、各染色体に特有のPCR産物が認められた。さらにPCR産物相互でのサザン解析からA9(A9(2859/4ー1)ー2)ー1で特異的に消失しているPCR産物がいくつか確認された。これらマ-カ-を手がかりにAT遺伝子座近傍をさらに詳細に解析中である。

A study on the characteristics of the development of genetic tumors in different cell lines was carried out. The results showed that: 1. A permanent cell line AT2KYSV derived from AT patients was used to isolate the DNA of AT gene. Chromosome X/11 of chromosome 11 of chromosome 11 of chromosome 11 2. During the process of chromosome migration, AT locus disappeared and at the same time, small loss occurred in 11q23 domain. Cell number-2859/4 - 1 was obtained. 2859/4-1 3. DNA analysis of chromosomes in cells A9 cells with chromosome 11, chromosome X and chromosome X/11 were constructed and compared with parent A9 cells in DNA amplification and chromosome specificity. PCR products specific to each chromosome were identified. The PCR products were analyzed by A9(A9(2859/4 - 1)-2)-1 and the specific PCR products were confirmed. A detailed analysis of the relationship between the two groups.

项目成果

江島 洋介: "Establishment of a novel immortalized cell line from ataxia telangiectasia fibroblasts and its use for the assignment of radiosensitivity gene" International Journal of Radiation Biology. 58. 989-997 (1990)

Yosuke Ejima：“从共济失调毛细血管扩张成纤维细胞中建立一种新型永生化细胞系及其用于放射敏感性基因分配的用途”国际放射生物学杂志 58. 989-997 (1990)。

江島 洋介: "Determination of the chromosomal site for the human radiosensitive ataxia telangiectasia gene by chromosome transfer" Mutation Research. 250. 337-343 (1991)

Yosuke Ejima：“通过染色体转移测定人类放射敏感性共济失调毛细血管扩张基因的染色体位点”突变研究 250. 337-343 (1991)。