AT(アタキシア・テランジェクタシア)の原因遺伝子の特性解析とその単離

AT（毛细血管共济失调）致病基因的表征和分离

• 批准号: 04152063
• 负责人: 江島 洋介
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152063/
• 关键词: アタキシア・テランジェクタシア; 高発がん性遺伝病; ヒト劣性遺伝病; 放射線ハイブリド

リンパ網内系の悪性腫瘍の好発を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)の原因遺伝子の単離を目的とし、AT遺伝子座近傍の染色体領域の解析とこの領域からのDNAの分離とクローン化を試み、以下の成果が得られた1.AT患者由来の永代細胞株AT2KYSVを受容細胞とした染色体移入実験から、AT遺伝子座位を11q23領域に同定した。染色体移入実験の過程で、AT座位を消失すると同時に11q23領域に微小欠失をもつヒト細胞クローン2859/4-1を得、2859/4-1からマウスA9細胞への微小核融合を行ない、欠失X/11を転座染色体を単一に保有する1クローンA9(2859/4/1/2)-1を得た。2.AT遺伝子座位近傍に転座点をもつヒトX/11転座染色体を有するヒト/マウス雑種細胞クローンA9(3552)-2に高線量のX線(30Gy〜120Gy)照射をして染色体を断片化した後マウス細胞に移入し、AT遺伝子座位近傍の微小な染色体断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。3.マウス細胞内でのヒト染色体のDNAを調べるためAlu-PCRによる解析を行なった。AluプライマーTC65と517を用い、第11番染色体、X染色体、X/11転座染色体を保有するA9細胞、今回作成したA9(2859/4/1/2)-1、放射線ハイブリド、および親株A9細胞のDNA間で比較した。DNA増幅はヒト染色体に特異的で、各染色体に特有のPCR産物が認められた。PCR産物相互のサザン解析からA9(2859/4/1/2)-1で消失し、特定の放射線ハイブリドに含まれるPCR産物がいくつか確認された。これらDNAマーカーを手がかりにAT遺伝子座位傍をさらに詳細に解析中である。

A study on the characteristics of the development of sex tumors in different cell lines, and the results of the study on the genetic analysis of the chromosome domain near the AT locus. AT During the process of chromosome migration, AT locus was lost, and at the same time, micro-deletion in 11q23 domain was obtained in 2859/4-1, micro-fusion in 2859/4 -1 and micro-fusion in 2859/4-1 was obtained in A9 cells, and micro-deletion in X/11 locus was obtained in 1 - 1. 2. Chromosome fragmentation was induced by high dose X-ray (30Gy ~ 120Gy) irradiation near the locus X/11 of AT gene locus. 3. DNA analysis of chromosomes in cells Comparison of DNA between A9 cells, which have chromosome TC65 and TC 517, chromosome 11, chromosome X and chromosome X/11, and A9(2859/4/1/2)-1, and parent A9 cells, which have chromosome X/11 and chromosome X/11, and A9(2859/4/1/2)-1, and A9 cells, which have chromosome X/11 and chromosome X/11, and A9(2859/4/1/2)-1, and A9 cells, which have chromosome X/11 and chromosome X/11. DNA amplitude-dependent chromosomes are identified by PCR products specific to each chromosome. PCR products were analyzed by PCR products from A9(2859/4/1/2)-1 to disappear, and PCR products from specific radiation sources were identified. The DNA sequence is analyzed in detail.