生理活性種一酸化窒素のバイオイメージング法の開発と生体系への応用

生理活性物质一氧化氮生物成像方法的开发及其在生物系统中的应用

• 批准号: 09273216
• 负责人: 長野 哲雄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09273216/
• 关键词: 一酸化窒素; バイオイメージング; 内皮細胞; マクロファージ; プローブ; 蛍光法

一酸化窒素合成酵素から生成する一酸化窒素は循環器系,免疫系,神経系などで多様な生理作用を示す事が明らかになりつつあるが,神経系においてはその真の作用機序は未だ混沌としており,議論の対象となっている.この原因の一つに常温で気体,かつ不安定なラジカル種である一酸化窒素を細胞内・組織中で刻々の時間変化に応じて的確に捉える手段がないことが挙げられる.本研究ではこの点を明らかにするために,すなわち一酸化窒素の細胞内・生体組織中での動態を解析するために,一酸化窒素のバイオメ-ジング法を開発することを目的に行われている.本年度の成果は蛍光法で一酸化窒素を捉える新親プローブ剤DAFを開発したことである.このDAFは刺激した細胞中からの一酸化窒素の検出に有用であるだけではなく,化学的に修飾したDAF-DAを用いることにより血管内皮細胞中から一酸化窒素を蛍光顕微鏡下,画像として検出することが可能である.具体的にはマクロファージ,メサンギウム細胞,内皮細胞,神経組織を用いた細胞系で成功している.一酸化窒素の検出測定法は各種報告されているが,いずれも欠点を有し,バイオイメージングの目的に叶うものはない.DAFは独自に開発されたもので,本方法の開発によりこの分野の研究に大きな進展をもたらすことは疑いない.次年度以降はpHの影響が少なくかつ励起光が生体に障害を与えない長波長領域の吸収を持った高機能性蛍光プローブの開発を行う予定である.さらに適用例として大脳組織切片,小脳組織切片における種々の刺激に対応した一酸化窒素の生成量,生成部位を明らかにすることになる.

The acidification smothering element synthesis enzyme か ら generated す る an acidification smothering は circulator system, immune system, god 経 department な ど で others more な を physiological role す matter が Ming ら か に な り つ つ あ る が, god 経 department に お い て は そ の is の role だ chaotic sequence は the sorter と し て お り, talk about の like と seaborne な っ て い る. こ の reason の つ に room temperature で 気 body, か つ unrest な ラ ジ カ ル kind で あ る a acidification, smothering element を cell tissue で carved 々 の time variations change に 応 じ て に really catch え る means が な い こ と が 挙 げ ら れ る. This study で は こ の point を Ming ら か に す る た め に, す な わ ち a acidification, smothering element の cell living body tissues で の dynamic を す る た め に, an acidification smothering の バ イ オ メ - ジ ン グ method を open 発 す る こ と を purpose line に わ れ て い る. の achievement this year は 蛍 method で を catch a acidification smothering element え る new pro プ ロ ー ブ tonic DAF を open 発 し た こ と で あ る. こ の DAF は stimulus し た cells か ら の an acidification smothering の 検 out useful に で あ る だ け で は な く, chemical modification of に し た DAF - DA を with い る こ と に よ り endothelial cells か ら an acidification smothering を 蛍 顕 micro light Under the mirror, the image と て検 shows する する とが possibly である. Specific に は マ ク ロ フ ァ ー ジ, メ サ ン ギ ウ ム cells, endothelial cells, god を 経 organization with い た cell line で successful し て い る. A acidification smothering element の 検 out measurement は various reports さ れ て い る が, い ず れ も points less を し, バ イ オ イ メ ー ジ ン グ の purpose に leaf う も の は な い. DAF は に alone open 発 さ れ た も の で, this method is の open 発 に よ り こ の eset の research に big き な progress を も た ら す こ と は suspected い な い. Annual in は pH の less influence が な く か つ wound up ray が raw body に handicap of を and え な い long wavelength domain の suction 収 を hold っ た high functional 蛍 light プ ロ ー ブ の open 発 を line う designated で あ る. さ ら に applicable example と し て 脳 biopsy, small 脳 biopsy に お け る kind 々 の stimulus に 応 seaborne し た an acidification smothering の generation, generating parts を Ming ら か に Youdaoplaceholder0 する とになる.

项目成果

Mitsutoshi Satoh: "Inhibitory Effects of a Fullerene Derivative,Dimalonic Acid C60,on Nitrit Oxide-Induced Relaxation of Rabbit Aorta" European Journal Pharmacology. 327. 175-181 (1997)

Mitsutoshi Satoh：“富勒烯衍生物二丙二酸 C60 对一氧化氮诱导的兔主动脉松弛的抑制作用”欧洲药理学杂志。

Naoki Umezawa: "Participation of Reaetive Oxygen Species in Photoclermatosis Induced by Quiuolone Antibacterial Agents" Arch.Biochem.Biophys.342. 275-281 (1997)

Naoki Umezawa：“活性氧参与喹啉酮抗菌剂诱导的光硬化症”Arch.Biochem.Biophys.342。

Takeshi Hamano: "Singlet Oxygen Production from Fullerene Derivatives : Effect of Sequential Funitionaligation of Fullerene Core" Chem.Comm.21-22 (1997)

Takeshi Hamano：“富勒烯衍生物的单线态氧生产：富勒烯核心的顺序功能化的影响”Chem.Comm.21-22 (1997)

Hirotatsu Kojima: "Development of a Fluorescent Indieator for Bioimaging of Nitric Oxide" Biol.Pharm.Bull. 20. 1229-1232 (1997)

Hirotatsu Kojima：“用于一氧化氮生物成像的荧光指示剂的开发”Biol.Pharm.Bull。

Yasuteru Urano: "Pronounced Axial Thiolate Ligand Effect on the Reactivity of Highvaleut Oxo-iron Porphyrin Intermediate" J.Am.Chem.Soc.119. 12008-12009 (1997)

Yasuteru Urano：“显着的轴向硫醇盐配体对高价氧化铁卟啉中间体反应性的影响”J.Am.Chem.Soc.119。